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技術(shù)文章

大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)PKABA1基因探針法PCR試劑盒使用方法

閱讀:971          發(fā)布時間:2022-7-5

大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)PKABA1基因探針法PCR試劑盒使用方法:

測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體

去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

銜接蛋白β抗體

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

水通道蛋白-9抗體

膜粘連蛋白A3抗體

膜粘連蛋白 A4抗體

自噬相關(guān)蛋白8A抗體

磷酸化蛋白激酶B抗體

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

磷酸化蛋白激酶B抗體

脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體

蛋白激酶錨定蛋白13抗體

AP-1μ2抗體

肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體

腦鈉通道蛋白1抗體

肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體

甲胎蛋白抗體

毛細(xì)血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體

酸性鈣調(diào)蛋白3抗體

磷酸化CD156b抗體

乙醇脫氫酶5抗體

乙醇脫氫酶6抗體


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