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實時熒光定量PCR標準品稀釋法
閱讀：4369 發(fā)布時間：2020-7-19實時熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料，利用熒光信號積累對PCR反應的過程，進行實時監(jiān)控實現(xiàn)起始模板的準確定量。實時熒光定量PCR標準品梯度稀釋方法依次是選擇目標、提取/PCR、純化、測試濃度、調整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間，覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法：1V原液（標準品為i）+9V稀釋緩沖液，得到標準品為ii。1V標準品ii+9V稀釋緩沖液，得到標準品為iii, 1V標準品iii+9V稀釋緩沖液，得到標準品為iv, 1V標準品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標準品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標準品ii、iii、iv、v，標準品要復管做測試，復管次數(shù)要遵循統(tǒng)計學要求。熒光PCR凍干時，制品溶液厚度不宜過厚。一般應為10-15mm，制品過厚的情形類似于濃度過高時的情況，不僅干燥的時間更長，塌陷、結塊。凍干機Pilot3-6T醫(yī)療應用涉及產品有：熒光PCR、免疫微球、化學發(fā)光、基因芯片、量子點、ELISA、膠體金、POCT、IVD校準品質控品校準品、內毒素檢測試劑、血清、白蛋白、干細胞及相應提取物等。
型號 | Pilot3-6T | Pilot5-8T | Pilot7-12T | Pilot10-15T |
凍干面積 | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶裝量（20ML） | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶裝量（5ML） | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱溫度（空載） | -85℃ | |||
真空度（空載） | ≤1Pa | |||
板層溫度（空載） | -55℃ | |||
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) | |||
板層數(shù)量 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板層尺寸（mm） | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 6L | 8L | 12L | 10L |
凍干效率 | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間距 | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墻隔離 | √ | √ | √ | √ |
凍干曲線擬合度 | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分壓控制 | √ | √ | √ | √ |
升華結束判定 | √ | √ | √ | √ |
凍干終點測試 | √ | √ | √ | √ |
壓塞 | 液壓 | |||
整機尺寸 （約） | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |