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| 供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 25T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A549/DDP | 主要用途 | 科研 |
種屬：人
組織來源：肺癌
生長特性：貼壁生長
形態(tài)特征：上皮細(xì)胞
微生物及支原體檢測：陰性
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
細(xì)胞株名稱：A549/DDP 人肺癌順鉑耐藥株 A549/DDP耐藥細(xì)胞
種屬：人
組織來源：肺癌
生長特性：貼壁生長
形態(tài)特征：上皮細(xì)胞
微生物及支原體檢測：陰性
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件:
*培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml DDP
血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141 或 HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法：
收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(最好是在 4X 物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml 新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用 PBS(不含鈣,鎂離子)洗 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱 1-3 分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶 10-30 秒，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注：1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡(4 或 5X 物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請?jiān)?10X 或 20X 物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請及時(shí)與我們聯(lián)系。
A549/DDP耐藥細(xì)胞凍存方法：
凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存
