細(xì)胞株名稱:L1210/Taxol耐藥細(xì)胞 小鼠白血病紫杉醇耐藥株
種屬:小鼠
組織來(lái)源:骨髓;慢性骨髓性白血?。–ML)
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
形態(tài)特征:淋巴母細(xì)胞
微生物及支原體檢測(cè):陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄
L1210/Taxol耐藥細(xì)胞
培養(yǎng)條件:
*培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%P/S+8ug/ml
血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,低速離心,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液(注意不要吸出細(xì)胞),換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 低速離心,棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中(補(bǔ)加*培養(yǎng)基至8到10ml)。如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。
凍存方法:凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存