Renca-GFP?細胞
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;專用防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:2-3周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時聯(lián)系銷售人員,我們將盡快為您解決Renca-GFP???細胞
1,簽收細胞后狀態(tài)穩(wěn)定可以先凍存留種
2,傳代當天用普通培養(yǎng)基,不要加嘌呤霉素,待細胞培養(yǎng)1-2天,密度達到40%后再加
3,階梯式加藥:待到細胞密度40%以上后,初次加1ug/ml維持觀察2天左右,細胞狀態(tài)無影響再加到1.5-2ug/ml,觀察2天無影響后,最后加到3ug/ml
4,復蘇后,待細胞狀態(tài)穩(wěn)定,密度40%以后,直接加3ug/ml,梯度加藥主要是針對第一次使用嘌呤霉素的時候,以免不同實驗室的藥物濃度和活性差異較大,第一次直接使用高濃度把細胞狀態(tài)弄受損
5,凍存后復蘇初期,可以用15%血清,讓狀態(tài)盡快穩(wěn)定,然后再降為10%
GFP 和 RFP 分別轉(zhuǎn)染的綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白 直接在熒光顯微鏡下 即可觀察
LUC是螢火蟲熒光素酶 需要加底物(D-熒光素鈉鹽)發(fā)光 激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nm
一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。