in vivo DNA RNA Advanced轉(zhuǎn)染試劑

1. 描述

   in vivo DNA RNA Advanced轉(zhuǎn)染試劑可以通過(guò)靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的方式完成轉(zhuǎn)染過(guò)程。此外，轉(zhuǎn)染過(guò)程中總注射體積較小，致密組織可通過(guò)顯微注射來(lái)完成轉(zhuǎn)染，且轉(zhuǎn)染復(fù)合物在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間較長(zhǎng)。DNA，siRNA及共轉(zhuǎn)染均可用此款轉(zhuǎn)染試劑來(lái)完成轉(zhuǎn)染操作。

    

2. 基本條件

3. DNA

   濃度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;

   溶劑: 質(zhì)粒DNA需溶于雙蒸水或超純水;

   內(nèi)毒素: 去內(nèi)毒素

4. RNA

       濃度: 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM

    

5. 活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染操作步驟

6. 轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備: 核酸和轉(zhuǎn)染試劑直接按照1:1混合。之后用移液器吹打混合溶液10-15次以充分混勻。將混合溶液于室溫環(huán)境中靜置10-15分鐘，轉(zhuǎn)染復(fù)合物即可制備結(jié)束。在復(fù)合物制備過(guò)程中，離心管的管壁要確保沒有液體殘留。

7. 用注射器或顯微注射針完成靜脈注射或局部組織注射操作。

8. 注射后3-5天，轉(zhuǎn)染效率可達(dá)到峰值，靶基因的表達(dá)量可于此時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。

    

   活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染注射用量

    

1. 注意事項(xiàng)

2.  DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與轉(zhuǎn)染試劑的比例為1:1。

3. 上表中siRNA的注射體積是針對(duì)20 μM siRNA的。如果siRNA的濃度為40 μM，則注射體積需減半；如果siRNA的濃度為80 μM，則注射體積需為表中體積的1/4；以此類推。

4. 進(jìn)行局部組織注射實(shí)驗(yàn)時(shí)，轉(zhuǎn)染復(fù)合物的用量為5-10 μl/cm2。

5. 進(jìn)行共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，核酸總用量應(yīng)和上表中用量一致，各種核酸用量的比例應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行調(diào)整。之后將各種核酸與轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行充分混合。

6. 在具體實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，核酸和轉(zhuǎn)染試劑的用量可根據(jù)上表中最大注射用量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

    

7. 訂貨信息

    

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