胞外多糖(EPS)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:
0.4mg/L - 50mg/L
使用目的:
本試劑盒用于測定微生物樣本中胞外多糖(EPS)含量。
實驗原理
中胞外多糖(EPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胞外多糖(EPS),再與HRP標記的胞外多糖(EPS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物底物TMB顯色。TMB在HRP呈正相關。用酶標儀在450計算樣品中胞外多糖(EPS)標準品(80mg/L)
0.5ml×1瓶 | ||||||||
3 | 板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 | |||
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
40mg/L | 5號標準品 | 150μl標準品稀釋液 |
20mg/L | 4號標準品 | 150μl標準品稀釋液 |
10mg/L | 3號標準品 | 150μl標準品稀釋液 |
5mg/L | 2號標準品 | 150μl標準品稀釋液 |
2.5mg/L | 1號標準品 | 150μl標準品稀釋液 |
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶標試劑50。
6. 溫育:操作同3。
7. 洗滌:操作同5。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
9. 終止:每孔加終止。
10. 測定:以空白孔調零,nm波長依序測量各孔的吸光 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算
;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.會有結晶4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
;2-8℃<span font-size:10.5pt;"="">。
2.有效期:6個月
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