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胞外多糖(EPS)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

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胞外多糖(EPS)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:

0.4mg/L - 50mg/L

使用目的:

本試劑盒用于測定微生物樣本中胞外多糖(EPS)含量

實驗原理

胞外多糖(EPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胞外多糖(EPS),再與HRP標記的胞外多糖(EPS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物底物TMB顯色。TMB在HRP呈正相關。用酶標儀在450計算樣品胞外多糖(EPS)標準品(80mg/L

0.5ml×1瓶









3

12孔×8條

9

標準品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張




6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個




標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

40mg/L

5號標準品

150μl標準品稀釋液

20mg/L

4號標準品

150μl標準品稀釋液

10mg/L

3號標準品

150μl標準品稀釋液

5mg/L

2號標準品

150μl標準品稀釋液

2.5mg/L

1號標準品

150μl標準品稀釋液


加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,混勻。

2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

5. 加酶:每孔加入酶標試劑50

6. 溫育:操作同3。

7. 洗滌:操作同5。

8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

9. 終止:每孔加終止。

10. 測定:以空白孔調零,nm波長依序測量各孔的吸光 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結:

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計算

;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.會有結晶4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

保存條件及有效期

;2-8<span font-size:10.5pt;"="">。

2.有效期:6個月


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