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上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第2年

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端粒長(zhǎng)度檢測(cè)

時(shí)間:2023/10/24閱讀:844
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TRF 法:科研和臨床金標(biāo)準(zhǔn) 

QPCR法: 操作簡(jiǎn)便,用時(shí)短,適用于批量檢測(cè) 

 

TRF法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度 

TRF分析也稱作端粒的Southern印跡法,是應(yīng)用針對(duì)端粒重復(fù)序列的探針來(lái)檢測(cè)限制性酶切后所 保留的端粒的方法。 

限制性酶會(huì)將基因組DNA消化為短的片段, 留下 大量完好的端粒,即所謂的端粒限制性片段。 

以凝膠電泳分離基因組片段 ,通過(guò)放射性探針 (CCCTAA)。 

圖片243.png

QPCR法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度 

端粒為染色體末端GGGATT  6堿基 重復(fù)序列 ,設(shè)計(jì)PCR引物十分困難(二聚體不可避免) ,也無(wú)法設(shè)計(jì)  Taqman探針

2002 , Richard通過(guò)引物中引入 突變 ,減少二聚體的產(chǎn)生 ,成功利  SYBR Green染料法測(cè)定端粒的相對(duì)長(zhǎng)度。 

  


 


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