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目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>分子生物學試劑>>反轉(zhuǎn)錄相關>> M-MuLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄試劑

M-MuLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄試劑
  • M-MuLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄試劑
參考價1500-4980
具體成交價以合同協(xié)議為準

參考價:¥1500 ~ ¥4980

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌
  • 型號
  • 代理商 廠商性質(zhì)
  • 北京市 所在地
規(guī)格

200KU 5萬U

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 貨號:M5124

>
規(guī)格
200KU4980元9999件可售
5萬U1500元9999件可售

更新時間:2024-12-16 17:15:10瀏覽次數(shù):339評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 M5124
M-MuLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄試劑通過基因重組技術克隆表達的點突變型 RNase H 活性缺失的 M-MuLV 反轉(zhuǎn)錄酶 TRUEscript Hˉ RTase。

M-MuLV Reverse Transcriptase


產(chǎn)品貨號M2000

儲存條件-20℃

濃度200 units/μl

組成

M2000

M-MuLV Reverse Transcriptase(200U/μl)

20萬U


制品說明

本制品使用通過基因重組技術克隆表達的點突變型 RNase H 活性缺失的 M-MuLV 反轉(zhuǎn)錄酶 TRUEscript Hˉ RTase。野生型的 M-MuLV 包含的 RNase H 活性能夠催化降解 DNA/RNA 雜合體中的 RNA, 因 此 在 cDNA First-Strand 的合成反應中可能會降解 RNA/DNA 雜合體中的模板 RNA。本酶 M-MuLV(RNase Hˉ)的 RNase H 活性缺失,與 M-MuLV 相比,具有更強的延伸能力和穩(wěn)定性,可用于較長的 cDNA 合成以及高比例的全 長 cDNA 文庫的構建等。  

適用范圍First-Strand cDNA 合成??捎糜诘涂截惢?/span>的檢測。

特點:合成 cDNA 片段長度可達 12 kb。

First-Strand cDNA 合成(以 20 μl 反應體系為例)

1、加入

Components

Volume

Total RNA/mRNA

50 ng-5 μg/5-500 ng

Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or

1 μl

Random Primer(0.1 μg/μl) or

1 μl

GSP(Gene Specific Primer)

2 pmol

dNTP Mixture (10 mM each)

1 μl

5× RT Buffer

4 μl

RNase Inhibitor(40 units/μl)

0.5 μl

TRUEscript Hˉ RTase

0.8-1μl (見注意事項 4)

RNase free H2O to final volume

20 μl


2、輕輕混勻

如用 Oligo(dT)18 或基因特異引物(GSP),42℃孵育 30-50min。

如用 Random Primer,25℃孵育 10 min,42℃孵育 30-50 min。

3、65℃加熱 15 min(或者 85℃加熱 5 min)失活 TRUEscript Hˉ RTase。

RT-PCR

建議取 1/10-1/5 體積(2-4 μl)的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為 PCR 模板。

建議 PCR 條件(以 50 μl 反應體系為例)

Components

Volume

Final Concentration

cDNA Template

2 μl

as required

Forward Primer (10 μM)

1 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10 μM)

1 μl

0.2 μM each

10×Taq Buffer (含 Mg2+)

5 μl

2.5 mM dNTPs

4 μl

0.2 mM

Taq DNA Polymerase

0.5 μl

2.5 units

ddH2O to final volume

50 μl

Not applicable

PCR 循環(huán)

M-MuLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄試劑


注意事項

1.避免 RNase 污染。

2.為保證反轉(zhuǎn)錄成功建議使用高質(zhì)量的 RNA 樣品。

3.如果 RNA 模板 GC 含量豐富或者有復雜二級結構,可以先只加 RNA 模板、引物和和 RNase free H2O 混勻, 65℃變性 5 分鐘,冰上冷卻,短暫離心后加入其它成分繼續(xù)下面的反轉(zhuǎn)錄步驟。

4.TRUEscript Hˉ RTase 非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸頭外導致?lián)p失,用前請點甩離心后使用,并且避免吸頭外壁沾附損失??梢悦看伟凑?0.8μl使用,也不影響使用效果。

5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

6、本品僅用于實驗研究。





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