目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>生化試劑>>染色劑>> C0040-100ml臺盼藍(lán)染色液0.4%
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | C0040 |
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臺盼藍(lán)溶液0.4%
產(chǎn)品貨號:C0040
儲存條件:4℃,12個月
產(chǎn)品性質(zhì)
別名:錐藍(lán)或錐蟲藍(lán)
分子式:C34H24N6Na4O14S4
分子量:960.81
CAS:72-57-1
產(chǎn)品描述
臺盼藍(lán)是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色,即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加,可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色,是常用的檢測細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。
Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活?;罴?xì)胞不會被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會被染成淡藍(lán)色。臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量,0.4%為常用的濃度。
自備材料:PBS 細(xì)胞ji數(shù)板 顯微鏡
參考步驟
1、收集細(xì)胞:
如為貼壁細(xì)胞,應(yīng)用yi蛋白酶- EDTA溶液消化細(xì)胞,收集細(xì)胞。
如果收集懸浮細(xì)胞,則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000~ 2000g離心1min , 棄上清,用1mIPBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。
2、臺盼藍(lán)染色:
吸取100μl細(xì)胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μl Trypan blue stain(0.4%)輕輕混勻,靜置染色3min(染色時間可適當(dāng)延長,但不宜超過10min)。
3、細(xì)胞計數(shù):
吸取經(jīng)過染色后的細(xì)胞,用血細(xì)胞ji數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量,每個細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計算公式如下:
細(xì)胞存活率= (細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)x 100%
注意事項
1、Trypan blue stain對人體有輕微毒性,請注意小心防護(hù)。
2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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