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目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>生化試劑>>染色劑>> CR001-500UL*20支CelRed(10000*)核酸染料

CelRed(10000*)核酸染料
  • CelRed(10000*)核酸染料
  • CelRed(10000*)核酸染料
參考價(jià)8848
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥ 8848

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • LABLEAD 品牌
  • CR001-500UL*20支 型號
  • 代理商 廠商性質(zhì)
  • 北京市 所在地
規(guī)格

500ul*20支

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 貨號:CR001

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規(guī)格
500ul*20支8848元999支可售

更新時(shí)間:2023-11-26 20:39:22瀏覽次數(shù):408評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 CR001
CelRed核酸染料特點(diǎn)
CelRed(10000*)核酸染料

無毒性、 靈敏度高、 穩(wěn)定性高、信噪比高、操作簡單、適用范圍廣、與EB有相同的光譜特性。

CelRed(10000*)核酸染料

貨號:CR001

儲(chǔ)存條件 常溫避光可保存24個(gè)月。

CelRed核酸染料特點(diǎn)

無毒性:CelRed du特的油性和大分子量特點(diǎn)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。

靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。

穩(wěn)定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強(qiáng)。

信噪比高:樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低。

操作簡單:與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激發(fā)。但是CelRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光wan全激發(fā),因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。

CelRed使用方法簡介

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

(1) 制膠時(shí)加入CelRed 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL CelRed 10,000× 儲(chǔ)液,以此比例類推)。

(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng):

u此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

u由于CelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將CelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。CelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

u如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關(guān),請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。





u此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

2 .泡染法

(1)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

(2)用H2O將CelRed 10,000× 儲(chǔ)液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL CelRed 10,000× 儲(chǔ)液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3)將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略


有不同。對于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。


(4)用 302nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。

注意事項(xiàng):

u用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

u3× CelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。

3.核酸電泳的PAGE步驟:

(1)將TBE制備的凝膠放入電泳槽中,用夾子夾住邊緣。

(2)用配置凝膠溶液同一批次的5×TBE灌滿緩沖液槽。用注射器排除凝膠底部的氣泡。

(3)用注射器吸取1×TBE沖洗加樣孔。將DNA樣品和適量的6×凝膠上樣緩沖液混合,用微量移液管加入加樣孔。

(4)將電極與電源相連(正極接下槽),打開電源一般90V;1~8V/cm。進(jìn)行電泳9h。

(5)電泳至標(biāo)準(zhǔn)參照染料遷移至所需位置(一般是電泳到二甲苯wan全遷出,溴酚藍(lán)距底邊

2~3cm停止)。關(guān)閉電源,拔掉插頭,棄去電泳槽中的電泳液。

(6)將凝膠取下來放入,染色皿中,加3XCelRed的1X緩沖液中的振蕩染色30-60分,放

置在紫外檢測即可。

注意事項(xiàng):

lPAGE 膠與瓊脂糖凝膠不同,不能用預(yù)染或點(diǎn)染的方法;只能用泡染的方法顯色,由于聚丙烯酰胺比較致密,染料不容易深入,顯色效果沒有瓊酯糖凝膠好。






特別提醒:

u 如果您使用的是紫外成像儀,請選擇CelRed;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇CelGreen。

u 在極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。





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