一體化熒光顯微成像系統(tǒng)適合用于快速活細胞熒光和磷光壽命成像。系統(tǒng)提供了高性能、高速度和用戶容易操作的熒光壽命成像方案,整合并包含了寬場、共聚焦、高光譜和全反射等顯微成像技術。系統(tǒng)主要包含四個部分:光源相機同步信號發(fā)生器,熒光壽命采集的增強型ccd相機,多通道調制LED光源或激光光源,專業(yè)圖像記錄與分析軟件。
一體化熒光顯微成像系統(tǒng)中重要的光學器件有光源、激發(fā)濾光片、二向色鏡、發(fā)散濾光片和相機等。這些裝置的作用如下:
1.光源
一體化熒光顯微成像系統(tǒng)需要強烈的近乎單色的光進行照明。主要使用以下四種類型的光源:包括氙氣燈或帶有激發(fā)濾光片的水銀燈、激光、超連續(xù)光譜光源和高功率發(fā)光二極管。激光被廣泛地用于更復雜的熒光顯微技術,像共聚焦顯微鏡或全內反射熒光顯微鏡。而氙氣燈、水銀燈和發(fā)光二極管與分色激發(fā)濾光片通常被用于廣角落射熒光顯微鏡。
2.激發(fā)濾光片
使用的光源大多是連續(xù)光譜,很難得到單一波長的光源,激發(fā)濾光片的作用是濾除多余的波段,只讓激發(fā)熒光的波長通過,避免光譜對樣本造成影響。
3.發(fā)散濾光片
樣本中的熒光蛋白在被特定波長的光源照射后會發(fā)出另一波長的光,這些攜帶樣本信息的光將被收集到相機上,但是用于成像的這部分光里面會摻雜著激發(fā)光,如果讓激發(fā)光也進入到相機里面會影響樣本的成像,發(fā)散濾光片的作用是濾除掉激發(fā)光提高圖像分辨率。
4.二向色鏡
二向色鏡的作用是對光線進行分束和將不同波長的光進行篩選,相較于普通的分光棱鏡,其優(yōu)勢為:穿透率高,反射效率高,吸收小,散色小,激光損耗少等。
5.相機:主要用于采集樣本的圖像。