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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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產品簡介
| 產地類別 | 國產 | 應用領域 | 食品,農業(yè) |
|---|
產品介紹
深圳艾瑞斯生產的氧氟沙星ELISA檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、動物組織（雞肉、豬肉、魚、蝦）、牛奶、奶粉和雞蛋等樣本中的氧氟沙星藥物（ofloxacin，OFX），試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的氧氟沙星藥物和酶標板上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗氧氟沙星藥物抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含氧氟沙星藥物含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中氧氟沙星藥物的殘留量。
氧氟沙星ELISA檢測試劑盒技術指標
2.1 試劑盒靈敏度：1.5ppb(ng/ml)
2.2 反應模式：25℃，45min～15min
2.3 檢測下限：
組織（雞肉、豬肉、魚、蝦） ………2ppb
蜂蜜 ……………………………………2ppb
牛奶 ……………………………………20ppb
奶粉 ……………………………………50ppb
雞蛋 ……………………………………30ppb
尿液 ……………………………………5ppb
血清 ……………………………………30ppb
2.4 交叉反應率：
氧氟沙星…………………………………100%
2.5 樣本回收率：
組織、蜂蜜、牛奶、奶粉、雞蛋、血清……85%±15%
3 試劑盒組成
酶標板……………………………96孔
標準液：各1ml
0ppb、1.5ppb、3ppb、6ppb、12ppb、24ppb
酶標記物（紅蓋）……………………5.5ml
抗體工作液（藍蓋）…………………5.5ml
底物液A（白蓋）……………………6ml
底物液B（黑蓋）……………………6ml
終止液（黃蓋）………………………6ml
20×濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml
5×復溶液（黃蓋） …………………50ml
說明書…………………………………1份
蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個
酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
1 編 號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應：加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應45分鐘。
3 洗 滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干（用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
4 顯 色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。
5 終 止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應。
6 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
注意事項
1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會導致所有標準的OD值偏低。
2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3 混合要均勻，洗板要徹底，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性。
4 在所有孵育過程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。
5 不要使用過了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6 顯色液若有任何顏色表明變質，應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質。
7 反應終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。
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