DL-Cyto-Fix & Perm Kit主要應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子或其他細(xì)胞質(zhì)分子染色，可固定并透化細(xì)胞，進(jìn)而對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行染色。C-Perm/Wash Buffer經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化，可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號強(qiáng)度。流式胞內(nèi)染色試劑盒

流式胞內(nèi)染色試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn)

特異性強(qiáng)，熒光信號強(qiáng)度高

產(chǎn)品成分

試劑配制

工作濃度C-Perm/Wash Buffer（1X）：將1體積C-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水，如將1ml C-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水，配制成10ml的1X C-Perm/Wash Buffer。1X C-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內(nèi)使用。

使用說明

（請?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn)）

1.細(xì)胞刺激：根據(jù)所使用細(xì)胞和所需檢測的分子特性，預(yù)先處理細(xì)胞。如所檢測胞內(nèi)分子為分泌型分子，需提前使用高爾基阻斷試劑阻斷檢測分子的分泌從而將所測分子滯留在細(xì)胞內(nèi)以便后續(xù)檢測。

2.表面染色（可選）：收集細(xì)胞后，每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體，充分重懸細(xì)胞，4℃，避光孵育30min后，加入500ul表面染色緩沖液，300g×5min，4℃離心，棄去上清液；

3.向每管細(xì)胞中加入200ul Fix Buffer (1X)，充分重懸細(xì)胞，4℃避光孵育12分鐘；

4.向每管細(xì)胞中加入500ul 1X C-Perm/Wash Buffer；

5.600g×5min離心，4℃，棄去上清液；

6.抗體孵育：每管加入100ul 1X C-Perm/Wash Buffer和適量體積的胞內(nèi)抗體，充分重懸細(xì)胞；

7.2-8°C避光孵育1h以上或過夜；

8.向每管細(xì)胞中添加500ul 1X C-Perm/Wash Buffer，洗去抗體；

9.600g×5min離心，4 ℃，棄去上清液；

10.將細(xì)胞重懸于300ul-500ul 1X C-Perm/Wash Buffer進(jìn)行上機(jī)分析。