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流式細(xì)胞儀是一種用于執(zhí)行流式細(xì)胞術(shù)測量方法的儀器。
該方法包括將激光束照射在流動液體樣本中的細(xì)胞上,檢測細(xì)胞發(fā)出的散射光和熒光,并測量細(xì)胞大小、數(shù)量以及細(xì)胞內(nèi)和表面抗原等特征。
與熒光顯微鏡相比,流式細(xì)胞儀具有可同時定量多個測定項目、分析速度快等優(yōu)勢。另一方面,流式細(xì)胞儀不適合觀察細(xì)胞的形態(tài)特征。
流式細(xì)胞儀應(yīng)用
流式細(xì)胞儀廣泛應(yīng)用于細(xì)胞相關(guān)的生物和醫(yī)學(xué)研究以及臨床檢測和治療??梢詼y量多種細(xì)胞類型。我們分析外周血白細(xì)胞以進行疾病診斷,分析培養(yǎng)的動植物細(xì)胞以及成體干細(xì)胞和腫瘤起始細(xì)胞等稀有細(xì)胞以進行表征。
其他可測量的物體包括微生物、浮游生物、精子、酵母和乳膠珠等海洋生物。
流式細(xì)胞儀原理
流式細(xì)胞儀由三個主要元素組成:流體系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)和電氣系統(tǒng)。流體系統(tǒng)具有接收樣品并將其流入流動池的功能,激光通過由光源、透鏡、濾光片和檢測器組成的光學(xué)系統(tǒng)照射到流動池上,產(chǎn)生光電流。
然后通過電氣系統(tǒng)檢測和分析細(xì)胞發(fā)出的熒光。流體系統(tǒng)由管道、閥門和泵組成,用于將懸浮在樣品中的熒光標(biāo)記細(xì)胞排列成一條線以供分析。
當(dāng)激光束穿過細(xì)胞中稱為檢測點的部分時,光會發(fā)生散射,同時與細(xì)胞結(jié)合的熒光染料會被激發(fā),從而發(fā)出熒光。然后,散射光和熒光被檢測器檢測為信號。散射光有兩種類型:前向散射信號(FS)和側(cè)向散射信號(SS)。
FS和SS采用不同的檢測器進行檢測,F(xiàn)S反映細(xì)胞的大小,SS反映細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。檢測到的信號由電子系統(tǒng)轉(zhuǎn)換成數(shù)據(jù),最終可以通過軟件進行解釋。