腫瘤抑制基因LPP2抗體

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

The Vang family of proteins are integral membrane proteins that are homologues of the Drosophila tissue polarity gene strabismus. The gene encoding for Van Gogh-like protein 1 (Vangl1), also designated Strabismus 2 (STB2),

SduI (Bsp1286I)規(guī)格：500 units

SmaI規(guī)格：1200 units

SmaI規(guī)格：5x1200 units

SmaI, HC規(guī)格：6000 units

SmaI規(guī)格：2000 units

TaqI規(guī)格：3000 units

TaqI規(guī)格：5x3000 units

XbaI規(guī)格：1500 units

XbaI規(guī)格：5x1500 units

XbaI, HC規(guī)格：7500 units

XbaI規(guī)格：3000 units

XhoI規(guī)格：2000 units

XhoI規(guī)格：5x2000 units

XhoI, HC規(guī)格：10000 units

XhoI規(guī)格：5000 units

Bst1107I (BstZ17I)規(guī)格：500 units

Van91I (PflMI)規(guī)格：400 units

Van91I (PflMI)規(guī)格：2000 units

BclI規(guī)格：1000 units

BclI規(guī)格：5000 units

BclI規(guī)格：3000 units

Mph1103I (NsiI)規(guī)格：1000 units

Mph1103I (NsiI)規(guī)格：5000 units

CpoI (RsrII)規(guī)格：200 units

CpoI (RsrII)規(guī)格：1000 units

MunI (MfeI)規(guī)格：300 units

MunI (MfeI)規(guī)格：1500 units

Psp5II (PpuMI)規(guī)格：500 units

SspI規(guī)格：500 units

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。