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離心小課堂 | 第二課:降服外泌體,我有“超”能力!

閱讀:27      發(fā)布時(shí)間:2024-11-20
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細(xì)胞作為我們生命最小的單位,我們有宏觀的溝通,他們自然也有微觀的溝通。而這細(xì)胞的“語(yǔ)言", 就是外泌體系統(tǒng)。

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外泌體系統(tǒng)的意義 

 

簡(jiǎn)單的來(lái)說(shuō),細(xì)胞通過(guò)分離自己的一部分膜,把自己“情話"(核酸,蛋白等)包裹成外泌體釋放出去,最后融入到別的細(xì)胞里進(jìn)行溝通。對(duì)于我們?nèi)祟悂?lái)說(shuō),破解了外泌體系統(tǒng)等于破解了細(xì)胞溝通的密碼,對(duì)于我們生命科學(xué)發(fā)展意義非凡。

 

用超速離心法純化外泌體 

 

研究外泌體的步,那一定是得先把這些小家伙給抓住。雖外泌體分離市場(chǎng)上百花齊放。 但這些分離技術(shù)都在純度上不盡人意。得到最純的外泌體,揭開(kāi)他們背后的故事,超速離心技術(shù)是選擇。

那么,

 

如何選擇合適的離心機(jī)進(jìn)行外泌體離心分離? 

 

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近日,麻省綜合醫(yī)院(MGH)的研究人員開(kāi)發(fā)的一款新型微流體裝置。 該裝置可以利用微流控技術(shù)快速檢測(cè)血液中癌癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體,以此作為癌癥診斷手段。

通訊作者Shannon Stott教授說(shuō),他們的設(shè)備能夠從在血液中數(shù)十億細(xì)胞外囊泡中挑選出腫瘤特異的細(xì)胞外囊泡。這將為未來(lái)癌癥診斷及監(jiān)控提供新的方法。[1]

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由此看來(lái),外泌體的應(yīng)用可謂是越來(lái)越廣泛了。這一技術(shù)也符合了當(dāng)今精準(zhǔn)醫(yī)療的熱點(diǎn)“液體活檢"思想, 應(yīng)用前景可謂十分的光明。關(guān)于液體活檢,它另一個(gè)簡(jiǎn)單粗暴的名字叫“滴血驗(yàn)癌"。想了解“液體活檢"的看官可以繼續(xù)關(guān)注我們的微信公眾號(hào)。我們往后會(huì)有詳細(xì)敘述。

 

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那么,超速離心技術(shù)在外泌體研究中到底是如何運(yùn)用的呢?

 

用超速離心法純化外泌體 

 

參考實(shí)驗(yàn)流程 

 

1.首先取細(xì)胞培養(yǎng)液上清或體液作為樣本,低速離心300 xg,10 min,分離出細(xì)胞;留上清 2000 x g離心,10 min,去除死細(xì)胞。

2.剩下上清繼續(xù)提高離心力到10000 xg,30 min,去除細(xì)胞碎片,處理好后的上清可準(zhǔn)備進(jìn)行超速離心步驟。以100,000 xg的離心力,離心70 min,得到粗制外泌體沉淀(含有少量雜蛋白)。

3.用PBS重懸外泌體沉淀,再次100,000 xg,離心70 min,即可得到純凈的外泌體。[2]

 

如何選擇合適的離心機(jī)進(jìn)行外泌體離心分離? 

 

推薦配置方案: 

 

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*此方案僅供參考,并未涵蓋所有轉(zhuǎn)頭、吊籃、適配器及離心管。 如有需要詳細(xì)配置方案,請(qǐng)聯(lián)系當(dāng)?shù)劁N售。

 

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