NobleRyder R0898 柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：R0898

產(chǎn)品名稱：柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

英文名稱：Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T

柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder R0898柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

本產(chǎn)品利用RNA在特定緩沖體系下能夠高效結(jié)合硅基質(zhì)材料的原理，采用硅膠膜離心吸附柱，適用于從培養(yǎng)細(xì)胞和動(dòng)物組織中提取總RNA，可以有效提取分子量大于200nt的RNA。提取過程中，無需使用苯fen氯仿等，采用DNase柱上處理，che底去除基因組DNA殘留，提取的RNA樣品經(jīng)PCR檢測(cè)不含基因組DNA，且極少含蛋白質(zhì)和其它雜質(zhì)的污染。本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單快速，且提取的RNA純度高，可直接用于RT-PCR、Northernblot、構(gòu)建cDNA文庫等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

自備材料：β-巰基乙醇、無水乙醇

1、Buffer RA 可能會(huì)形成沉淀，如果有沉淀出現(xiàn)，請(qǐng)于60℃加熱溶解，然后待恢復(fù)至室溫后使用。

2. 操作前請(qǐng)根據(jù)樣品數(shù)量，按照1mlBufferRA中加入10μlβ-巰基乙醇的比例，配制裂解液。建議該裂解液現(xiàn)用現(xiàn)配。若配好的裂解液沒有用完，可在4℃保存1個(gè)月。

3. 首ci使用，請(qǐng)?jiān)贐ufferRW2中加入48ml無水乙醇，并做好標(biāo)記。

操作步驟（僅供參考）：

1. 細(xì)胞或組織的裂解

1) 貼壁細(xì)胞：

che底吸棄培養(yǎng)液，按照每6-10cm2面積加入600μlBufferRA（使用前請(qǐng)加入β-巰基乙醇），用移液器吹打3-5次使細(xì)胞裂解。少于6-10cm2面積加入350μlBufferRA。

2) 細(xì)胞懸液：

500×g 離心收集細(xì)胞，che底吸棄培養(yǎng)液，每5×106-1×107細(xì)胞加入600μlBufferRA（使用前請(qǐng)加入β-巰基乙醇），用移液器吹3-5次使細(xì)胞裂解。少于5×106細(xì)胞加入350μlBufferRA。

3) 動(dòng)物組織：

取600μl Buffer RA（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入β-巰基乙醇）加入到1.5ml離心管中。組織樣品經(jīng)液氮研磨后，將研磨成粉末狀的樣品（20-30mg）加入到上述1.5ml離心管中，劇烈震蕩混勻直至裂解液中無明顯沉淀。若組織樣本低于20mg，則加入350μlBufferRA。

2. 向上述組織裂解混合物中加入590μlNuclease-freeWater(DEPC-treated)和 10μlProteinase K，混勻后56℃孵育10-20min。

3. 12,000 rpm 離心 2min，小心吸取管中的上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中，盡量避免觸及管中的細(xì)胞碎片沉淀。

4. 緩慢加入0.5倍上清液體積的無水乙醇，混勻（此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀），將得到的溶液和沉淀一起轉(zhuǎn)入SpinColumnswith Collection Tubes-RC（吸附柱放在收集管中），12,000rpm離心30s，棄除收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

5. 向吸附柱中加350μlBufferRW1，12,000rpm離心30s，棄除收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

6. 配制RNase-free DNase 工作液：取10μlRNase-free DNase，加入至新的RNase-free 離心管中，加70μl Buffer DB，混合均勻，配制成終體積為80μl的RNase-freeDNase工作液。

7. 向吸附柱中央加入80μlRNase-freeDNase工作液，室溫放置15min。

8. 向吸附柱中加入350μlBufferRW1，12,000rpm離心30s，棄除收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

9. 向吸附柱中加入500μlBufferRW2（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm離心30s，棄除收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

10. 重復(fù)操作步驟9一次。

11. 將吸附柱放回收集管中，室溫12,000rpm離心3min。

注：此步驟十分重要，否則BufferRW2中殘留的乙醇會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

12. 將吸附柱放入一個(gè)新的1.5ml 離心管（DNase/RNase-free），加入50-100μlBufferTB，室溫放置1-2min，12,000 rpm 離心1min，得到RN溶液。所得的RNA應(yīng)立即使用或適量分裝后-80℃保存，避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：

1． 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。

2． 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒 質(zhì)粒提取 

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R0898 柱式超純動(dòng)物RNA小提試劑盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit  50T