NobleRyder G1848 GUS染色試劑盒，GUS Stain Kit

產(chǎn)品貨號：G1848

產(chǎn)品名稱：GUS染色試劑盒，GUS Stain Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

GUS染色試劑盒 植物組織染色

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：GUS染色試劑盒

英文名稱：GUS Stain Kit

規(guī)格：100ml

儲存條件：-20℃，避光保存，有效期6個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G1848 GUS染色試劑盒，GUS Stain Kit產(chǎn)品介紹

GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶，該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS受體基因系統(tǒng)有表達(dá)E.coli GUS酶的穩(wěn)定性和在植物內(nèi)的低活性，絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。5-Bromo-chloro-3-indolyl β-D-glucuronide，cyclohexylammonium salt(簡稱為X-Gluc或X-GlcA)，是檢測大腸桿菌中GUS基因的底物，可快速檢測植物中GUS基因融合標(biāo)記。

GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應(yīng)條件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍(lán)色物質(zhì)，該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì)，具有GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)，可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以及組織和細(xì)胞的組織化學(xué)染色，多用于轉(zhuǎn)基因植物的GUS基因表達(dá)分析。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟：(僅供參考)

1. 配制X-GlcA工作液：取X-GlcA溶劑229ul加入至80mgX-GlcA中或取適量上述2種物質(zhì)溶解，使 其濃度達(dá)到350mg/mL，輕輕混勻，即為X-GlcA工作液，分裝后，-20℃避光保存。 2. 按下列比例配制GUS染色液：

3. 固定(固定不是必須的步驟，如果不需要固定，直接進(jìn)行操作步驟4)：

① 取轉(zhuǎn)基因植物組織，加入到3-5mL左右清潔小瓶或多孔板中。

② 取適量2×緩沖固定液與去離子水等量稀釋即獲得1×緩沖固定液。加入3-5倍組織體積的1×緩沖固 定液沒過組織，室溫孵育45min，棄液。

③ 配制洗滌液：按GUS緩沖液 A:去離子水=1:20稀釋，即為洗滌液。用配制好的洗滌液漂洗3次。 每次1min。

4. 加入適量GUS染色液，使GUS染色液wan全浸沒組織。

5. 用真空泵抽取小瓶或多孔板中的氣體，抽取時(shí)間應(yīng)大于2min。該步驟是為了抽取植物組織內(nèi)的氣體， 并使染色液更容易進(jìn)入組織內(nèi)。

6. 立即蓋緊瓶子或多孔板，37℃孵育24h。隨著孵育時(shí)間的延長，藍(lán)色漸漸出現(xiàn)，當(dāng)表達(dá)量較高時(shí)，GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)。

7. 用75%乙醇脫去樣本的葉綠素，一般樣本浸沒于乙醇1-3h。如有必要可重復(fù)該脫色步驟，以便徹di清除葉綠素。樣本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光學(xué)顯微鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

1.    配制好的GUS染色液可以2-8℃避光保存半個(gè)月。

2.    X-GlcA 工作液應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則染色效率會下降。

3.    由于組織特異性等原因，藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不wan全一致，應(yīng)注意摸索具體實(shí)驗(yàn)條件。

4.    為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

GUS染色試劑盒 植物組織染色 

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder G1848 GUS染色試劑盒，GUS Stain Kit 100ml