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北京諾博萊德科技有限公司
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當(dāng)前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測(cè)>>抗逆系列>> BA6009過氧化氫酶試劑盒 鉬酸銨比色法 抗逆

過氧化氫酶試劑盒 鉬酸銨比色法 抗逆

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)BA6009

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2025-03-28 16:33:59瀏覽次數(shù):86次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/48S
貨號(hào) BA6009 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 是最主要的H2O2 清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2 清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。
過氧化氫酶試劑盒 鉬酸銨比色法 抗逆

過氧化氫酶(Catalase,CAT)試劑盒(鉬酸銨比色法)說明書

分光光度法 50 管/48

過氧化氫酶試劑盒 鉬酸銨比色法 抗逆

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2 清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

測(cè)定原理:


過氧化氫能氧化 MoO 2-MoO52-,MoO52-接受氫氧根的電子成鍵,分子間立即脫水縮合,得到穩(wěn)定的黃色復(fù)合物(H2MoO4·XH2O)n 405nm 處有強(qiáng)烈吸收峰,其吸光值和過氧化氫濃度成線性關(guān)系。測(cè)定出體系剩余過氧化氫在 405nm 的吸光值即可反映 CAT 的催化活性。


組成:

 

產(chǎn)品名稱

BA6009-50T/48S

Storage

提取液:酸性提取液

60ml

4℃

試劑一:液體

6ml

4℃避光

試劑二:液體

18ml

RT

試劑三:液體

45ml

4℃

說明書

一份

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 405 nm。

2、在EP 管中加入下列試劑

試劑名稱(μl)

測(cè)定管

空白管

樣本

15


試劑一

90


混勻,25℃準(zhǔn)確反應(yīng) 2 min

試劑二

300


試劑三

795

795

試劑二


300

提取液


15

試劑一


90

混勻,取 1ml 1ml 玻璃比色皿中立即測(cè)定A 空白和A 測(cè)定,ΔA=A 空白-A 測(cè)定???/span>

白管只需做一管。

CAT 活性計(jì)算:

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.18x + 0.0013       R2 = 1          x:體系中過氧化氫濃度變化值(μmol/ml)

y:吸光值差值ΔA

2、血清(漿)CAT 活力的計(jì)算:

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘催化 1μmol H2O2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(μmol /min/ml)= =(ΔA-0.0013)÷0.18×V 反總÷V 樣÷T

=222.22×(ΔA-0.0013)

3、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 CAT 活力計(jì)算:

(1)   按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘催化 1μmol H2O2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0013)÷0.18×V 反總÷(V 樣×Cpr) ÷T=222.22×(ΔA-0.0013)÷Cpr

(2)   按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g 組織每分鐘催化 1μmol H2O2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0013)÷0.18×V÷(W× V 樣÷V 樣總)÷T=222.22×(ΔA-0.0013)÷W

V 反總:反應(yīng)體系總體積,1.2 ml;V 樣:加入樣本體積,0.015 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml。

注意事項(xiàng):

1、預(yù)實(shí)驗(yàn)若發(fā)現(xiàn)酶活性過高(A 測(cè)定<0.1),可用提取液適當(dāng)稀釋樣品后測(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

2、若 A 空白<A 測(cè)定,一方面可能是酶活性過低,可將反應(yīng)時(shí)間 2 延長到 5min,另一方面可能樣本中雜質(zhì)干擾嚴(yán)重,可將樣本稀釋 5 倍左右后測(cè)定,并在計(jì)算公式中代入實(shí)際反應(yīng)時(shí)間和乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

過氧化氫酶試劑盒 鉬酸銨比色法 抗逆

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