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亮an酸氨基肽酶試劑盒 氨基酸

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號BH6005

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質生產商

所  在  地北京市

更新時間:2025-04-01 09:13:05瀏覽次數(shù):66次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/48S
貨號 BH6005 應用領域 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 血清 LAP 活性的檢測能從不同側面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展
LAP 是一類能水解肽鏈N-末端為亮an酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細胞損傷,血清LAP 的活性均有不同程度的升高,因此,血清 LAP 活性的檢測能從不同側面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展。
亮an酸氨基肽酶試劑盒 氨基酸

亮an酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48

亮an酸氨基肽酶試劑盒 氨基酸

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

LAP 是一類能水解肽鏈N-末端為亮an酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細胞損傷,血清LAP 的活性均有不同程度的升高,因此,血清 LAP 活性的檢測能從不同側面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展。

測定原理:

LAP 分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算LAP 活性。

組成:

產品名稱

BH6005-50T/48S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

40ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20℃

說明書

1

自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(ml)為 1000~5000:1 的比例(建議 2000 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

LAP 測定步驟:

1、分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 405nm,蒸餾水調零。

2、將試劑二轉移至試劑一中充分溶解(如較難溶解,可 50℃水浴加熱約 30min 促進溶解);在 37℃

(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 250μl 樣本和 750μl 試劑一,混勻后立即記錄 405nm 處初始吸光值A1 和 2min 后的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1。

注意事項:若ΔA 大于 0.5,需將酶液用提取液稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。使 A2-A1 小于

0.5,可提高檢測靈敏度。

LAP 活力單位的計算:

1、血清(漿)LAP 活力的計算:

單位的定義:每ml 血清(漿)每分鐘生成 1 nmol 的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/ml)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣÷T=205.8×ΔA 2、組織、細菌或細胞中LAP 活力的計算:

按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g 組織每分鐘生成 1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V 樣÷V 樣總) ÷T=0.103×ΔA

V 反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.25 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數(shù),2000 萬。


亮an酸氨基肽酶試劑盒 氨基酸

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