土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）測定試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

土壤脲酶測定試劑盒

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

S-UE 能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。

測定原理：

利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N。

試劑的組成和配制：

試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20ml 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的試劑 4℃保存；試劑四A 液：液體 1ml×1 瓶，4℃保存；試劑四B 液：液體 4ml×1 瓶，4℃保存；臨用前將A 液倒入B 液中混合，待用；用不完的試劑 4℃保存一周。

自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

測定步驟：

1、培養(yǎng)

2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1ml 上清液，加入 0.9ml 蒸餾水）。

3、測氨量：

混勻， 578nm 處蒸餾水調(diào)零，測A 值，ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。

脲酶活力計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373；x 為標準品濃度（μg/ml），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。

脲酶活力（μg/d /g 土樣）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)

10：稀釋倍數(shù)；T：反應時間，1d； V 反總：反應體系總體積：2ml；W：樣本質(zhì)量，0.25g。

土壤脲酶測定試劑盒