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產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子（咽-拭子、鼻-拭子、口腔拭子、  陰道拭子等）中提取微量病毒 DNA 的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

1.操作簡單，整個過程只需要 20 分鐘左右，不需要額外在洗柱液中補加乙醇。

2.靈敏度高，通過PCR 檢測到的最終靈敏度可以達到 30-50 拷貝/mL。

3.安全無毒，不需要使用苯-酚和氯仿等有機溶液。

4.如果加上病毒離心富集步驟，最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。

5.與 PCR 和熒光PCR 兼容。

6.價廉物美，性價比遠高于國外同類產(chǎn)品。

7.適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。

8.本試劑盒足夠 50 次提取。

9.病毒 DNA 純化試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份 規(guī)格包裝

病毒裂解液 30 mL30 mL 本色瓶

上柱結(jié)合液 40 mL60 mL 本色瓶

離心吸附柱 50 套塑料袋

通用洗柱液 50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脫液 10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊 1 份無

運輸及保存

常溫運輸及保存，DNA 病毒裂解液長期（1 月以上）放置時需要放 4℃，有效期一年。

自備試劑

無，但需要自備 RNase-free 的 1.5 mL 離心管（耗材）。

使用方法：

1.如果有 N 個樣品，標記 N+2 個 1.5-2 mL 離心管，多出的一個為陽性對照，一個為陰性對照。為避免污染，建議不要使用壓蓋式塑料離心管。在每個管上做個標記，以在后續(xù)操作時區(qū)別向心面和離心面。然后在離心管中分別加入 0.2 mL 液體樣品（血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等），陽性對照和陰性對照。

1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品，則將拭子放入 0.2 mL 自備生理鹽水中擠壓出液體，然后取 0.2 mL 進行提取。

1.2、 如果是糞便等半固定樣品，則取約 0.3 mL 的樣品，加入 0.3 mL 自備生

理鹽水，震蕩重懸，離心取 0.2 mL 上清進行提取。

1.3、  如果血液，細胞培養(yǎng)液等含細胞的液體，可以離心用上清，也可以直接取用，但后者提取的病毒 DNA 中會有少量細胞的基因組 DNA 污染（但不影響 PCR）。血漿的抗凝劑必須是 EDTA 或 ACD，不能是肝素。使用 ACD 時由于所加入 ACD 會增加體積，樣品會被稀釋，得到的病毒滴度會比使用 EDTA 低 15%左右。血漿最好按 0.6 mL/管的量分裝保存，以避免反復凍融。

1.4、  如果樣品是實體組織或培養(yǎng)細胞，則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心，用 0.2 mL 上清液（含病毒）進行提取，但此種情況下最后得到的病毒 DNA 不可避免的會含有少量基因組 DNA 污染（但不影響 PCR 檢測） 。

1.5、 如果液體樣品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘，移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL繼續(xù)操作。

2.加入 0.6 mL DNA 病毒裂解液到各離心管中，振蕩 30 秒混勻后室溫放置 10 分鐘裂解病毒。注意：DNA 病毒裂解液在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用。

3.加入 0.8 mL 上柱結(jié)合液到離心管中，顛倒混勻后轉(zhuǎn)移一半的混合液（0.8 mL） 到離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘。

4.12,000 × g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

5.將剩余的另外一半裂解液（0.8 mL）轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘。

6.12,000 × g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

7.加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12000 × g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

8.加入 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12000 × g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。此為第二次洗滌，可以跳過。

9.12,000 × g 室溫離心 1 分鐘（干甩），棄含穿透液的離心管。

10.將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的RNase-free 的 1.5 mL 離心管中，在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-100 ?L DNA 洗脫液 3.0，然后室溫放置 2 分鐘。

11.12000 × g 室溫離心 1 分鐘，離心管中的溶液即為病毒 DNA 溶液。

12.DNA 樣品可以直接用于PCR，也可放-20℃長期保存。

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