目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 蛋白膠微量回收試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1863 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Mini Protein Gel Extraction Kit |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介:
十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electropheresis, SDS-PAGE)不僅可用于檢測蛋白質(zhì)的
相對分子質(zhì)量,而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一,隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化, 有必要從凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的微量蛋白膠回收法。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.簡單,不需要復(fù)雜而昂貴的儀器(如電洗脫儀)。
2.適用于變性膠(SDS-PAGE)和非變性膠。
3.回收率一般在 50-90%之間(跟蛋白質(zhì)大小,洗脫時(shí)間相關(guān))。
4.跟后續(xù)的實(shí)驗(yàn)兼容,包括 2-D 電泳、質(zhì)譜測序等。
5.本產(chǎn)品足夠使用 50 次。
6.蛋白膠微量回收試劑盒只可用于科研。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
蛋白膠微量純化溶液 A10 mL10 mL 本色瓶
蛋白膠微量純化溶液 B50 mL60 mL 本色瓶
專用研磨杵50 只塑料袋
使用手冊1 份無
運(yùn)輸及保存
常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
自備試劑
無
使用方法:
1.按常規(guī)方法進(jìn)行變性(SDS-PAGE)或非變性蛋白電泳。
2.切取含目的蛋白的膠(盡可能地把多余的膠切除,否則會影響回收效率)。注意: 固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建議把樣品分多孔上樣,電泳后只切其中一個(gè)樣孔的膠條進(jìn)行固定和染色,然后將此膠條放回到在整體膠中原來的位置, 通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對應(yīng)區(qū)域,并切下此區(qū)域的膠進(jìn)行回收。
3.將切下的膠塊轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 塑料離心管中。
4.用研磨杵充分將膠塊壓磨成盡可能細(xì)小的碎片。
5.加入 200 ?L 蛋白膠微量純化溶液 A,4℃搖晃洗脫至少 2-16 小時(shí)(過夜)。此時(shí)最好將蛋白膠微量純化溶液 B 放在冰箱預(yù)冷。
6.10,000×g 離心 10 分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中,注意不要吸取碎膠。
7.加入 5 倍體積的預(yù)冷的蛋白膠微量純化溶液 B,搖晃混勻。
8.-20℃放置至少 10-30 分鐘。
9.室溫 12,000×g 離心 5-20 分鐘,棄上清。
10. 室溫充分晾干,得到的沉淀即為回收的蛋白質(zhì)。回收的蛋白質(zhì)可溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)(2-D 電泳、質(zhì)譜測序等)。
選擇我們的蛋白膠微量回收試劑盒,就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航!
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