隨著生物制藥工業(yè)的發(fā)展，通過將單克隆抗體本身的二硫 鍵打開，由此在半胱氨酸的自由巰基上偶聯(lián)小分子藥物 的 ADC 越來(lái)越多。由于此類 ADC 分子鏈間的二硫鍵被打 開，其輕/重鏈之間僅靠非共價(jià)鍵結(jié)合，在傳統(tǒng)的變性質(zhì) 譜條件下會(huì)解離成抗體片段，無(wú)法測(cè)定完整蛋白的分子量。 非變性質(zhì)譜（Native MS）是一種近年來(lái)得到不斷發(fā)展和 推廣的新興分析技術(shù)，可以在保持蛋白非共價(jià)作用力條件 下進(jìn)行分子量測(cè)定，采用非變性質(zhì)譜進(jìn)行 cysteine-linked ADC 分析顯示了強(qiáng)大的應(yīng)用潛力。
Thermo ScientificTM Q ExactiveTM Plus Biopharma 平臺(tái)質(zhì) 譜儀保持了 賽默飛Orbitrap 超高分辨質(zhì)譜平臺(tái)的固有優(yōu)點(diǎn)，如高 分辨率、高質(zhì)量精度和高靈敏度兼具，在此基礎(chǔ)上又對(duì)其 mass range 做了進(jìn)一步擴(kuò)展，新增的 High Mass Range Mode（HMR Mode）m/z 上限可至 8000 Da，同時(shí)又針 對(duì)高質(zhì)量端離子傳輸進(jìn)行了優(yōu)化，進(jìn)一步提高了高質(zhì)量端 離子的傳輸效率，并改進(jìn)了 HCD 的壓力調(diào)節(jié)。該平臺(tái)包 括三種不同分析模式（Standard Mode、Protein Mode 及 HMR mode），可覆蓋生物制藥領(lǐng)域的表征全流程。
變性條件下分子量的測(cè)定在 賽默飛Q Exactive HF 平臺(tái)上進(jìn)行，相 關(guān)實(shí)驗(yàn)條件如下： 液相： Thermo Ultimate 3000 RSLC
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