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聚乙二醇－聚乙烯亞胺介導(dǎo)小干擾RNA體外轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的研究
閱讀：895 發(fā)布時間：2013-10-25| 提 供 商 | 美國布魯克海文儀器公司 | 資料大小 | 0K |
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作者：梁嫣然 劉中霖 畢偉 帥心濤 王偉偉 陶恩祥
510120 廣州，中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（梁嫣然、劉中霖、陶恩祥）；510275 廣州，中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院（帥心濤、王偉偉）；510630 廣州，暨南大學(xué)附屬*醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（畢偉）
摘要：目的 研究聚乙二醇-聚乙烯亞胺（PEG-PEI）作為非病毒納米載體介導(dǎo)小干擾RNA（siRNA） 體外轉(zhuǎn)染C17.2 NSCs的效果。 方法 采用自行設(shè)計合成的PEG-PEI與靶向Nogo 受體復(fù)合體基因的siRNA 形成復(fù)合物，通過粒徑與電位的測定、凝膠阻滯電泳實(shí)驗(yàn)等方法觀察PEG-PEI/siRNA納米復(fù)合物的表征及復(fù)合效果。以脂質(zhì)體復(fù)合體系Lipofectamine 2000/siRNA 為對照，采用流式細(xì)胞儀檢測不同N/P 比（PEG-PEI 中氮原子和siRNA 中磷原子的摩爾比）的PEG-PEI/siRNA復(fù)合物對NSCs的轉(zhuǎn)染效率。 結(jié)果 PEG-PEI和siRNA形成粒徑為納米級別的復(fù)合物袁隨著N/P比增大，復(fù)合物的粒徑逐漸減小，而表面電位逐漸增大。凝膠阻滯電泳實(shí)驗(yàn)表明siRNA 與PEG-PEI可以通過靜電相互作用而穩(wěn)定結(jié)合。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染率后發(fā)現(xiàn)，N/P=15時，PEG-PEI/siRNA復(fù)合物轉(zhuǎn)染率zui高，可達(dá)（78.72依8.18）%。 結(jié)論 PEG-PEI 是一種有良好發(fā)展前景的非病毒型siRNA 轉(zhuǎn)運(yùn)載體，對神經(jīng)干細(xì)胞基因治療具有潛在的應(yīng)用價值。
關(guān)鍵詞：神經(jīng)干細(xì)胞；轉(zhuǎn)染；共聚物；載體