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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
探討兩種方法檢測(cè)HBsAg假陽性和假陰性的影響因素2023/12/26
為了減少HBsAg檢測(cè)出現(xiàn)假陽性和假陰性,我們有必要對(duì)這種現(xiàn)象的原因進(jìn)行分析,在實(shí)際的檢測(cè)工作中,造成HBsAg檢測(cè)出現(xiàn)假陽性和假陰性主要受以下因素影響,分述如下:1、ELISA法假陰性原因1.1標(biāo)本用肝素或EDTA等抗凝處理易造成HBsAg檢測(cè)結(jié)果假陰性,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷,能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中的辣根過氧化物酶活性,造成假陰性。1.2標(biāo)本保存不當(dāng),在冰箱內(nèi)保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多
人T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLV p19)試劑盒使用說明書2023/12/19
人T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLVp19)試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:48T1pg/ml-50pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLVp19)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLVp19)水平。用純化的人T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLVp19)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入T淋巴細(xì)胞白血病病毒p19(HTLVp19),再與HRP標(biāo)記的T
標(biāo)本溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響及其處理方法2023/12/12
溶血對(duì)不同檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的干擾機(jī)制不同,主要包括:1.細(xì)胞內(nèi)外成分濃度差的干擾,當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí),細(xì)胞內(nèi)含量高的物質(zhì)順濃度差溢出,使測(cè)定結(jié)果明顯偏高,如ALT、AST、LDH、K+、CK等。2.溶血時(shí),血細(xì)胞中濃度低的物質(zhì)稀釋血漿標(biāo)本,使測(cè)定結(jié)果偏低,如ALP、GGT等。3.細(xì)胞內(nèi)、外液成分之間存在干擾。4.有色物質(zhì)對(duì)某些項(xiàng)目化學(xué)反應(yīng)前后顏色變化的吸收光譜產(chǎn)生干擾,如血紅蛋白干擾對(duì)TP、TBIL等的測(cè)定,由于血紅蛋白的顏色影響原實(shí)驗(yàn)最佳波長(zhǎng)的選擇。5.溶血還可造成乙型肝炎病毒表面抗原假陽性的'檢測(cè)結(jié)果
ELISA實(shí)驗(yàn)操作秘籍2023/12/05
如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項(xiàng)有哪些呢?相信很多做實(shí)驗(yàn)的小伙伴都有這樣的疑問,今天小編就給大家總結(jié)一下,注意聽講哦!ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),主要利用的是抗原抗體特異性結(jié)合的特點(diǎn),可分為直接法、間接法、雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法等。下面以間接法為例進(jìn)行介紹:1、方陣ELISA。用途:①融合前后確定鼠血清中抗體效價(jià);②拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時(shí)首先要確定包被原及抗體的優(yōu)質(zhì)工作濃度。經(jīng)典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結(jié)果OD值P/N2的
雞白細(xì)胞介素6(IL-6)elisa試劑盒使用說明書2023/11/28
雞白細(xì)胞介素6(IL-6)elisa試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1ng/L-40ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素6(IL-6)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞白細(xì)胞介素6(IL-6)水平。用純化的雞白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素6(IL-6),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB
尿微量白蛋白的檢測(cè)方法2023/11/21
目前,尿微量白蛋白的檢測(cè)方法主要有:ELISA方法、放射免疫法、化學(xué)發(fā)光法、免疫透射比濁法以及免疫熒光法。ELISA方法靈敏性高,但操作步驟多,等待檢測(cè)結(jié)果時(shí)間比較長(zhǎng),需要有門的實(shí)驗(yàn)室、業(yè)人員完成,一般用于大批量標(biāo)本的檢測(cè)。不適于少量或單份檢測(cè)的快速檢測(cè)。放射免疫法靈敏度高、操作簡(jiǎn)便,測(cè)量和數(shù)據(jù)處理易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。但因其為相對(duì)定量及存在放射線輻射、污染問題等應(yīng)用較少?;瘜W(xué)發(fā)光法因其特異性、敏感性高、簡(jiǎn)便快速、無需外來光源,背景噪音低應(yīng)用廣泛,但其選擇性差、其發(fā)射強(qiáng)度依賴于各種環(huán)境因素,需嚴(yán)格控制
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)土壤/植物樣本的采集及保存方法2023/11/14
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)土壤/植物樣本的處理方法植物標(biāo)本的精采集及保存1、稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;2、加入1ml的提取液(80%甲醇),置于-20度過夜;3、于4度,8000rpm,離心1小時(shí),取上清;4、上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是:80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%yimi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮?dú)獯蹈桑4鎮(zhèn)溆茫?、上樣前加入pH7.4
琥珀酸(SUCN)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書2023/11/07
琥珀酸(SUCN)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測(cè)定樣本中琥珀酸(SUCN)的含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中琥珀酸(SUCN)水平。用純化的琥珀酸(SUCN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入琥珀酸(SUCN),和HRP標(biāo)記的琥珀酸(SUCN)抗原,使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的琥珀酸(SUCN)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值
bca法制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)發(fā)生較大偏高的原因2023/10/31
BCA法是一種常用的蛋白質(zhì)濃度檢測(cè)方法,它通過比色反應(yīng)測(cè)定樣品中的蛋白質(zhì)濃度。如果在BCA法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)出現(xiàn)了偏高的情況,可能有以下原因:標(biāo)準(zhǔn)品的配制不準(zhǔn)確:在BCA法中,標(biāo)準(zhǔn)品的配制非常關(guān)鍵,如果標(biāo)準(zhǔn)品的濃度不準(zhǔn)確,會(huì)導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線的點(diǎn)位偏高或者偏低。反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng):在BCA法中,試劑的反應(yīng)時(shí)間對(duì)結(jié)果有較大影響。如果反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)過度,使得吸光度值偏高。樣品中含有干擾物質(zhì):某些樣品中可能含有干擾物質(zhì),如膽固醇、尿素等,這些物質(zhì)可能被誤判為蛋白質(zhì),從而導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果偏高。非特異性反應(yīng):BC
皮質(zhì)醇測(cè)定分析前的影響因素2023/10/24
皮質(zhì)醇是由機(jī)體下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)神經(jīng)軸系HPA的調(diào)節(jié)控制,下分泌受到生物節(jié)律性體液性及神經(jīng)的調(diào)控,盡管當(dāng)前大多實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用全自動(dòng)生化儀器已能較為準(zhǔn)確地測(cè)定出血清中皮質(zhì)醇的含量,但由于檢測(cè)的標(biāo)本在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前的所有工作環(huán)節(jié)是不受檢驗(yàn)科所監(jiān)控,標(biāo)本的采集質(zhì)量,檢驗(yàn)人員是無從得知,檢驗(yàn)質(zhì)量更是無法保障.為了使廣大醫(yī)務(wù)人員能對(duì)實(shí)驗(yàn)室分析前質(zhì)量控制引起重視,了解皮質(zhì)醇在檢測(cè)前所需要注意的事項(xiàng),有效提高皮質(zhì)醇測(cè)定的檢驗(yàn)質(zhì)量.在此重點(diǎn)闡述皮質(zhì)醇分析前的各類影響因素,并探討如何盡量控制和避免這些因素對(duì)皮質(zhì)醇
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)ELISA試劑盒使用說明書2023/10/17
大鼠糖化血紅蛋白(GHb)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T35nmol/L-1200nmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定全血樣本中糖化血紅蛋白(GHb)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠糖化血紅蛋白(GHb)水平。用純化的大鼠糖化血紅蛋白(GHb)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖化血紅蛋白(GHb),再與HRP標(biāo)記的糖化血紅蛋白(GHb)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TM
ELISA技術(shù)中的抗原與抗體的反應(yīng)2023/10/09
1.2.1抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈(L)和兩個(gè)重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤?,有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區(qū),分別用VH和VL表
標(biāo)本溶血對(duì)ELISA有影響嗎2023/09/27
生化項(xiàng)目(1)結(jié)果偏高的項(xiàng)目溶血對(duì)乳酸脫氫酶(LDH)的影響最大,可使測(cè)定值升高達(dá)100-180;其次是肌酸激酶(CK),高達(dá)約69倍;;再次,是血清磷(P)和鉀(K),前者為50倍,后者為20-30倍。還有谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),10-30倍;肌酸激酶同工酶(CK-MB)15倍;谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),7倍。其他受到影響但影響程度尚不明確的有鈉(Na),鎂(Mg),鐵(Fe),氯化物(CL),總蛋白(TP),α-羥丁酸脫氫酶(HBDH),低密度脂蛋白(LDH)等。(2)結(jié)果偏低的項(xiàng)目溶血導(dǎo)致某些項(xiàng)
人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)elisa試劑盒使用說明書2023/09/19
人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)elisa試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T3ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)水平。用純化的人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15),再與HRP標(biāo)記的生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)抗體結(jié)合,形
細(xì)菌多重 PCR 快速檢測(cè)2023/09/12
簡(jiǎn)介多重PCR是一種在普通PCR基礎(chǔ)上建立的一種可以同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)目的片段的檢測(cè)多種細(xì)菌分子生物學(xué)的技術(shù),其利用多對(duì)特異性引物同時(shí)擴(kuò)增,提高了擴(kuò)增效率,節(jié)省了成本。優(yōu)點(diǎn)在于檢測(cè)的速度快、準(zhǔn)確性高和操作簡(jiǎn)單,特別適用于臨床、環(huán)境和食品檢測(cè)等領(lǐng)域。原理多重PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR的基礎(chǔ)上加以改進(jìn)后的一種新型技術(shù),其基本原理與常規(guī)PCR相同,是通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來達(dá)到目的片段的擴(kuò)增。當(dāng)DNA雙鏈處于90℃高溫時(shí),雙鏈DNA會(huì)解旋成單鏈DNA;當(dāng)溫度降到60℃左右時(shí),引物與特定的靶序列相結(jié)合;當(dāng)溫度升到7
植物蛋白提取實(shí)驗(yàn)說明2023/09/04
植物蛋白提取試劑適用于多種植物根,莖,葉及果實(shí)等的新鮮或凍存組織。植物組織成分復(fù)雜,含有較多酚類物質(zhì)、多糖、色素、次生代謝物質(zhì)等,致使植物蛋白質(zhì)的分離提取變得困難和復(fù)雜。本試劑采用優(yōu)化的試劑和程序,能有效提取多種植物中的可溶性和疏水性蛋白成分,有效去除植物組織所含的多酚、多糖、醌、色素、脂質(zhì)、次生代謝物質(zhì)等干擾蛋白質(zhì)研究的成分,使提取的蛋白質(zhì)處于蕞佳的活性狀態(tài)和檢測(cè)狀態(tài),適應(yīng)于酶學(xué)活性測(cè)定,單向及雙向蛋白電泳,WesternBlot和免疫共沉淀分析等蛋白質(zhì)研究實(shí)驗(yàn)。組成和規(guī)格:無色透明的提取試劑
牛白細(xì)胞介素-18(IL-18)ELISA試劑盒使用說明書2023/08/22
牛白細(xì)胞介素-18(IL-18)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T3ng/L-100ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素-18(IL-18)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛白細(xì)胞介素-18(IL-18)水平。用純化的牛白細(xì)胞介素-18(IL-18)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素-18(IL-18),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素-18(IL-18)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體
牛血清成分及其作用大揭秘2023/08/16
血清為天然培養(yǎng)基中最為重要和在組織培養(yǎng)中最常使用的天然培養(yǎng)基。血清之所以成為培養(yǎng)中不可少的成分,主要因?yàn)檠逯泻泻芏喾Nbu可缺少的能維持細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的成分。在按人體內(nèi)成分模擬制成的合成培養(yǎng)基中,細(xì)胞所需成分雖相當(dāng)齊全,但仍然缺少很多能影響細(xì)胞增殖和各種生物學(xué)性狀的未知成分,故只有補(bǔ)充血清后,細(xì)胞才能更好地生長(zhǎng)增殖和進(jìn)行一定的功能活動(dòng)。因此當(dāng)前血清仍然為培養(yǎng)細(xì)胞中bu可缺少的天然成分。那血清的主要成分及其作用都有哪些呢?01.蛋白質(zhì)雖然蛋白質(zhì)是血清的主要成分,但許多蛋白質(zhì)的功能在體外情況下所剩無
酶法提取膠原蛋白的方法介紹2023/08/08
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動(dòng)物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對(duì)酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用zui多。將膠原進(jìn)行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價(jià)鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可
二核苷酸(CpG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書 競(jìng)爭(zhēng)法2023/08/01
二核苷酸(CpG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測(cè)定樣本中二核苷酸(CpG)的含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中二核苷酸(CpG)水平。用純化的二核苷酸(CpG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入二核苷酸(CpG),和HRP標(biāo)記的二核苷酸(CpG)抗原,使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的二核苷酸(CpG)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)
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