人西尼羅河病毒IgG ELISA檢測試劑盒
【簡單介紹】
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【詳細說明】
人西尼羅河病毒IgG ELISA檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
檢查
1.實驗室檢查
白細胞數(shù)減少,腦炎型者腦脊液中淋巴細胞增多,蛋白增高。
2.免疫學檢查
利用血清學抗體檢測方法,常用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)法,采用患者急性期和恢復期雙份血清,兩份血清同時進行檢測,以恢復期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性,有助于本病的診斷。
3.病原學檢查
自潛伏末期至發(fā)病后第5天,從患者血液或腦脊液中分離出病毒,陽性率較高,對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進行中和實驗。
4.分子生物學檢查
RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))法檢測,通過設(shè)計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標本進行RT-PCR試驗,陽性率高,具有特異性診斷價值。
用途
西尼羅(WN)病毒IgG ELISA,利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒,不用于篩查血液或血液成分。僅供專業(yè)人員體外診斷使用。
概述
感染了西尼羅病毒會導致包括腦炎等一系列癥狀的疾病,西尼羅病毒在世界廣泛傳播,已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經(jīng)CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原,它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學指標,WNRA蛋白是一種重組抗原,它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構(gòu)成。
實驗的原理
檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。
提供的材料
- 微孔板(96孔 12x8):即用 每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2-8℃下保存至保質(zhì)期。
注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。
- IgG樣品稀釋液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- IgG陰性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- IgG陽性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- 洗滌液(10X):1瓶 120ml 2-8℃下保存至使用。
- EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
- 酶聯(lián)物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- TMB底物液: 1支 9ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- 終止液;1支6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
試劑應(yīng)避免反復凍融。
西尼羅河引發(fā)腦炎IgG免疫診斷試劑盒
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熱帶病西尼羅河病毒檢測試劑盒
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出入境西尼羅河病毒檢測試劑盒
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人西尼羅河病毒IgG ELISA檢測試劑盒
西尼羅抗原 |
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板條#1 | 板條#2 | |
A | WNRA | WNRA |
B | WNRA | WNRA |
C | WNRA | WNRA |
D | WNRA | WNRA |
E | NCA | NCA |
F | NCA | NCA |
G | NCA | NCA |
H | NCA | NCA |
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a. 吸出生長液,用PBS將單層細胞洗1次 b.在單層細胞中加入1.5ml溶于1×HBS的15%甘油,在37℃ 培養(yǎng)0.5~3minc.吸出甘油,用PBS將單層細胞洗1次d.加入 5ml預加溫的*生長液,放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24~60h 后,檢測DNA的瞬時表達或?qū)⒓毎匦路N入適當?shù)倪x擇性培 養(yǎng)基中,分離穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化體。④業(yè)以表明,丁酸鈉也可以 在猴源和人源細胞中增強帶SV40早期啟動子/增強子的重組 質(zhì)粒的表達。可直接在生長液中加入有關(guān)試劑,也可以使 經(jīng)過甘油休克的細胞接受丁酸鈉處理。須視細胞型別的不 同,采用不同濃度的丁酸鈉(500mmol/L貯存液,在化學通 風櫥中用NaOH中和丁酸制備而成),例如:CV-1 10mmol/LNIH-3T3 7mmol/LHelaS3 5mmol/LCHO 2mmol/L不加*生長液,然后重復步驟d。(6)轉(zhuǎn)移基因 表達和細胞集落形成①瞬時表達:在轉(zhuǎn)染后48~60h收獲細 胞,進行RNA或DNA雜交分析。
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