美國FOCUS西尼羅河熱IgG抗體檢測試劑盒(ELISA法)
【簡單介紹】
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【詳細(xì)說明】
西尼羅河熱IgG抗體檢測試劑盒(ELISA法)
廣州健侖生物科技有限公司
檢查
1.實驗室檢查
白細(xì)胞數(shù)減少,腦炎型者腦脊液中淋巴細(xì)胞增多,蛋白增高。
2.免疫學(xué)檢查
利用血清學(xué)抗體檢測方法,常用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)法,采用患者急性期和恢復(fù)期雙份血清,兩份血清同時進(jìn)行檢測,以恢復(fù)期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性,有助于本病的診斷。
3.病原學(xué)檢查
自潛伏末期至發(fā)病后第5天,從患者血液或腦脊液中分離出病毒,陽性率較高,對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進(jìn)行中和實驗。
4.分子生物學(xué)檢查
RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))法檢測,通過設(shè)計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標(biāo)本進(jìn)行RT-PCR試驗,陽性率高,具有特異性診斷價值。
用途
西尼羅(WN)病毒IgG ELISA,利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒,不用于篩查血液或血液成分。僅供專業(yè)人員體外診斷使用。
概述
感染了西尼羅病毒會導(dǎo)致包括腦炎等一系列癥狀的疾病,西尼羅病毒在世界廣泛傳播,已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經(jīng)CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原,它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學(xué)指標(biāo),WNRA蛋白是一種重組抗原,它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構(gòu)成。
實驗的原理
檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。
提供的材料
- 微孔板(96孔 12x8):即用 每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2-8℃下保存至保質(zhì)期。
注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。
- IgG樣品稀釋液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- IgG陰性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- IgG陽性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- 洗滌液(10X):1瓶 120ml 2-8℃下保存至使用。
- EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
- 酶聯(lián)物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- TMB底物液: 1支 9ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- 終止液;1支6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融。
西尼羅河病毒IgG、IgM聯(lián)合診斷試劑盒
西尼羅河病毒IgG、IgM聯(lián)合診斷試劑盒
西尼羅河熱IgG抗體檢測試劑盒(ELISA法)
操作步驟:
- 標(biāo)記將要使用的板條,注意微孔板已經(jīng)按照統(tǒng)一排列,如下所述包被西尼羅抗原和質(zhì)控抗原。
西尼羅抗原 |
| |
板條#1 | 板條#2 | |
A | WNRA | WNRA |
B | WNRA | WNRA |
C | WNRA | WNRA |
D | WNRA | WNRA |
E | NCA | NCA |
F | NCA | NCA |
G | NCA | NCA |
H | NCA | NCA |
- 將血清樣品﹑陰性質(zhì)控和陽性質(zhì)控同樣地用樣每孔加入50ul稀釋后的樣品,以下為一個血清樣品使用一個板條的*。
- 品稀釋液按1:300稀釋。
| 板條1 | 板條2 | |
血清樣品 | |||
A | IgG N | 樣品1 | |
B | IgG N | 樣品1 | |
C | IgG P | 樣品2 | |
D | IgG P | 樣品2 | |
E | IgG P | 樣品2 | |
F | IgG P | 樣品2 | |
G | IgG N | 樣品1 | |
H | IgG N | 樣品1 |
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這一效率可以相差若干個數(shù)量級, 它起決于:a.受體細(xì)胞的型別(即使同一細(xì)胞系,克在化 膿性球菌中,肺炎鏈球菌的致病力僅次于金黃色葡萄球菌 。不同的是,到目前為止,肺炎鏈球菌極少對青霉素類抗 生素產(chǎn)生耐藥性。肺炎球菌主要的致病物質(zhì)是肺炎球菌溶 血素及莢膜。莢膜具有抗原性,是肺炎鏈球菌分型的依據(jù) 。此菌可引起大葉性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病。生 物學(xué)性狀編輯肺炎鏈球菌電鏡下的形態(tài)肺炎鏈球菌電鏡下 的形態(tài)⒈菌體呈矛頭狀,多成雙排列,寬端相對,*相 背,有較厚莢膜,革蘭陽性.⒉培養(yǎng)特性和生化反應(yīng) 營養(yǎng) 要求及在血平板上菌落特征基本同甲型鏈球菌,培養(yǎng)時間 稍久菌落中央下陷呈臍窩狀.在血清肉湯中培養(yǎng)稍久亦因細(xì) 菌自溶而使混濁的培養(yǎng)液漸變澄清.自溶酶可被膽汁或膽鹽 等物質(zhì)活化,加速細(xì)菌溶解,故可用膽汁溶菌試驗與甲型 鏈球菌相區(qū)別;肺炎鏈球菌能分解菊糖這點也可作為與甲 型鏈球菌相區(qū)別的依據(jù).⒊抗原結(jié)構(gòu)與分型⑴莢膜多糖抗原 按此抗原不同分為84個血清型,個別型還可分成不同的亞 型.其中有20多個型可引起疾病.
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