ASFV檢測非洲豬瘟診斷試紙卡
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ASFV檢測非洲豬瘟診斷試紙卡
廣州健侖生物科技有限公司
廣州健侖生物可提供適合:生豬屠宰場、養(yǎng)豬場、肉類加工廠等單位針對非洲豬瘟的檢測系統(tǒng)??梢宰龅皆谑宸昼妰?nèi)對非洲豬瘟病毒進行排查監(jiān)測,也可以在三十分鐘內(nèi)對非洲豬瘟病毒核酸進行檢測鑒定。
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我司還提供其它進口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
ASFV檢測 非洲豬瘟診斷試紙卡
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五、注意事項
1、用于裂解的噬菌體、宿主菌為新鮮培養(yǎng)獲得時,裂解好、裂解噬菌體收獲量大。
2、液體培養(yǎng)裂解時,如到培養(yǎng)時間時裂解尚未發(fā)生,可適當(dāng)提高培養(yǎng)溫度或加大搖震速度。
3、RNase A 、DnaseI消化不全,DNA、RNA可粘走部分噬菌體。
4、苯酚/*抽提時,注意PEG、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)污染,它們會影響限制性內(nèi)切酶切割。
1、按0.1-0.01的感染復(fù)數(shù)(MOI)將噬菌體接種到200ml對數(shù)生長期的菌液,培養(yǎng)至菌液變澄清。
2、按1%的比例(v/v)加入*,37°C振蕩30min,裂解菌體。
3、裂解后的菌液于8000g離心5min,然后用0.22μm孔徑濾膜過濾。
4、濾液中加入216μl緩沖液L1(20mg/ml RNase A,6mg/ml DNase I,0.2mg/mL BSA,10mM EDTA,100 mM Tris-HCl和300 mM NaCl,pH 7.5),在37°C輕輕振蕩1小時。
5、然后加入30ml冰冷的緩沖液L2(30%聚乙二醇(PEG)6000,3M NaCl),4°C放置過夜。
6、4°C 10000g離心30分鐘。
7、棄上清,沉淀用用9ml緩沖液L3(100mM Tris-HCl,100mM NaCl,25mM EDTA,pH7.5)重懸。
8、然后加入9ml緩沖液L4(4% SDS),70°C孵育20min。
9、冰浴冷卻后,加入9ml緩沖液L5(2.55 M醋酸鉀,pH 4.8),4°C 10000g離心30min。
10、上清液用核酸提取純化試劑盒(如QIAGEN-tip 100)提取噬菌體基因組DNA。
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