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產品簡介
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 10 g |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20203ES10 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
產品介紹
Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍G250染色液
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍G250染色液 | 20203ES10 | 10g | 室溫 | 178.00 |
產品描述
考馬斯亮藍（Coomassie brilliant blue）是兩種相似三苯甲烷染料的總稱，有G250和R250兩種，結構上前者比后者多了2個甲基，命名上“G"為Green 的縮寫，因G250的藍色染料泛淺綠色；命名上“R"為Red的縮寫，因R250的藍色染料呈微紅色調；“250"表示考馬斯亮藍的純度。生化實驗中常將考馬斯亮藍用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是：通過與蛋白質內的氨基和羧基基團間的靜電結合作用以及范德華力，考馬斯亮藍與蛋白質形成強但非共價鍵連接的復合物。蛋白-染料復合物的形成穩(wěn)定染料攜帶的負電荷陰離子（如磺酸基），從而產生在膜上或者膠上肉眼可見的藍色。
考馬斯亮藍G250染色液更多用于電泳蛋白的染色，染色靈敏度比氨基黑高5倍，可達0.1 µg蛋白。但是染色背景比較深，需要褪色后才能進行蛋白條帶的觀察?？捡R斯亮藍G250對蛋白膠染色的靈敏度相對較差，zui低檢測到0.5 µg蛋白。但是因其在三Cl|乙|酸中不溶而以膠體形式存在，選擇性的和蛋白質結合形成復合物，染色迅速，著色深的蛋白質條帶數秒內可以顯現出來，約45 min后著色最深。而且染色背景低，不需要脫色即可進行蛋白條帶的觀察。因此，非常適合對電泳凝膠蛋白的快速定性分析。
考馬斯亮藍G250較多的用于溶液體系中蛋白的定量分析，即Bradford蛋白結合檢測法（Bradford protein-binding assay），此方法利用的就是G250與蛋白質結合的特性，Bradford試劑（也就是酸化的G250溶液）為陽離子，主要為雙質子化，溶液為紅色，其最大吸收波長（Amax）為470 nm。當與蛋白穩(wěn)定結合后，G250以陽離子，非質子化的形式存在，溶液變?yōu)樗{色，最大吸收波長遷移到595 nm。藍色陽離子形式染料的量與樣本中蛋白的量成正比，因此通過直接測定595 nm的吸光度來反映蛋白量。此法的優(yōu)點在于G250與蛋白質結合所需的時間較短（約2 min左右），且結合的G250-蛋白質復合物室溫下約1 h內保持穩(wěn)定。反應靈敏度高，是一種非常常用的微量蛋白快速定量方法。
產品性質
中文別名（Chinese synonym） | 酸性藍90；考馬斯亮藍G；康美賽藍G250 |
英文別名（English synonym） | Acid blue 90 Coomassie Brilliant Blue G |
CAS號（CAS NO.） | 6104-58-1 |
分子式（Formula） | C47H48N3NaO7S2 |
分子量（Molecular weight） | 854.02 |
外觀（Appearance） | 藍色至紅色結晶粉末 |
溶解性（Solubility） | 微溶于水，最好先溶于甲醇或者乙醇 |
結構式（Structure） |
|
運輸與保存方法
室溫運輸和保存即可。
使用方法
1.快速染色步驟（考馬斯亮藍G250）
1）考馬斯亮藍G250染色液的配制
將0.2 g G250溶于100 mL水中（需要加熱至50°C促進溶解）。冷卻后，加入100 mL 2 N H2S04。室溫放置3 h-過夜，然后濾紙除雜。過濾后的溶液，小心加入22.2 mL 10 N KOH，然后加入28.7 g TCA。混勻后室溫放置>3 h，再次過濾除雜從而獲得琥珀般的棕色溶液，不含藍色沉淀。
2）染色只需將膠浸在此染色液中，約15 min后條帶就會顯示出來。幾個小時后染色條帶的亮度和靈敏度會進一步加強。
3）染色液室溫約穩(wěn)定存放2-3周。
2.Bradford蛋白定量檢測（考馬斯亮藍G250）
參考Bradford Protein Quantification Kit Bradford蛋白濃度測定試劑盒（貨號：20202ES76）的操作步驟。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）本產品僅作科研用途！
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