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Nissl Staining Solution 尼氏染色液

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

尼氏染色液是以德國的精神病學(xué)家和神經(jīng)病理學(xué)家Franz Nissl的名字命名的，主要用于石蠟或冰凍切片神經(jīng)元細(xì)胞漿

中的尼氏小體(Nissl body)染色。染色后呈藍(lán)紫色，用于顯示腦或脊髓的基本神經(jīng)結(jié)構(gòu)。Nissl小體大而數(shù)量多，說明神經(jīng)細(xì)

胞合成蛋白質(zhì)的功能較強(qiáng)；相反，在神經(jīng)細(xì)胞受到損傷時，Nissl小體的數(shù)量會減少甚至消失。尼氏染色液的有效成分是Cresyl violet，該成分可以和RNA或DNA結(jié)合，也可以對粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體以及細(xì)胞核染色。

運輸與保存方法

室溫運輸。室溫避光保存，至少1年有效。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）Nissl染色液的染色能力很強(qiáng)，并且染色后很難去除，請注意勿使染色液沾染皮膚和衣物等。

3）需自備4%多聚甲醛、無水乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無水乙醇及二甲苯。

4）樣品數(shù)量較多時，可以用染色架和染色缸，便于操作。第—次使用本產(chǎn)品時建議先取1-2個樣品進(jìn)行預(yù)實驗。

使用方法

一. 樣本處理：

1）對于石蠟切片：

①二甲苯中脫蠟5-10 min，共三次。注：脫蠟不充分會導(dǎo)致染色不均勻；

②無水乙醇5 min；

③90%乙醇2 min；

④70%乙醇2 min；

⑤蒸餾水2 min。

2）對于冰凍切片：

①用4%多聚甲醛固定10 min以上。
②蒸餾水洗滌2 min。
③換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2 min。

3）對于培養(yǎng)細(xì)胞：

①用4%多聚甲醛固定10 min以上；

②蒸餾水洗滌2 min；

③換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2 min。

二. 染色步驟：

1）對上述處理好的樣品，用尼氏染色液染色3-10 min (可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間，染色時溫度提高到37-50 ℃對于25-50 μm等較厚的切片可以使染色更均勻）。

2）蒸餾水洗滌2次(每次數(shù)秒鐘即可)。

3）95%乙醇洗滌約5 Sec。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明及封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。

【注】：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行尼氏染色。

三. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色

1) 脫水、透明、封片：

①95%乙醇脫水2 min；

②換用新鮮的95%乙醇再脫水2 min。

③二甲苯透明5 min。

④換用新鮮的二甲苯，再透明5 min。

⑤用中性樹膠或其它封片劑封片。

⑥顯微鏡下觀察，細(xì)胞呈現(xiàn)斑駁的藍(lán)紫色染色。

2) 進(jìn)行其它染色：

如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在尼式染色液染色后：

①70％乙醇洗滌2次，每次2 min。

②PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5 min。

③即可進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。

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HB200831