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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 40207ES |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
臺盼藍(lán)染色液 Typan Blue Solution
臺盼藍(lán)(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料,可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜,將其染成藍(lán)色,而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性,可將臺盼藍(lán)排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細(xì)胞(活細(xì)胞呈透明無色)和死細(xì)胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外,臺盼藍(lán)(合適濃度)還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
本品為溶于生理鹽溶液的0.4%(w/v)臺盼藍(lán)染色液,以無菌形式提供,細(xì)胞培養(yǎng)級別。
運輸和保存方法
室溫運輸和保存即可,二年有效。
注意事項
1)細(xì)胞計數(shù)前,需要用生理鹽緩沖液或者無血清培養(yǎng)基對細(xì)胞進行充分的清洗,因為細(xì)胞對血清蛋白具有非常高的親和力,殘留的血清蛋白會導(dǎo)致較暗的染色背景。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,充分清洗后,用適當(dāng)緩沖液如PBS,HBSS重懸制成單細(xì)胞懸液;對于貼壁細(xì)胞,先用胰|酶消化細(xì)胞,再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。
2)取0.5ml單細(xì)胞懸液,按照1:1比例與0.5ml 0.4%臺盼藍(lán)染色液充分混勻,室溫染色3~10min。
【注1】:因臺盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性,染色時間過久會導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色,干擾計數(shù)。
【注2】:若細(xì)胞密度比較高,可取0.2ml單細(xì)胞懸液,經(jīng)適當(dāng)緩沖液稀釋到0.5ml,之后再用0.5ml 0.4%臺盼藍(lán)染色液染色。
3)取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞|計數(shù)板,于顯微鏡低倍鏡下計數(shù),分別計算著色細(xì)胞(即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞)和總細(xì)胞。
【注1】:用移液槍加染色細(xì)胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通??刂圃?0-50 cells,當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過200個,需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4)按照以下公式來計算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比,
a,計算每ml細(xì)胞數(shù)目:Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104;【注】:此時的稀釋倍數(shù)為:步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b,總細(xì)胞數(shù)目:Total cells=(Cells/ml)×zui初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c,細(xì)胞活力值:Viability(%)=(總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù))/總細(xì)胞數(shù) ×100
【注】:通常情況,健康的對數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞,活細(xì)胞至少占到95%。
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40207ES60 | 0.4% Trypan Blue Solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%) | 100ml | 193.00 |
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40208ES76 | Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit 臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 500T | 279.00 |
40724ES10 | Trypan blue 臺盼藍(lán) | 10g | 237.00 |