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線粒體紅色熒光探針
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):2941更新時間:2025-02-07 13:39:44

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50ug
貨號 40741ES50 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
MitoTracker® Red CMXRos線粒體紅色熒光探針是一種細胞滲透型的X-rosamine衍生物,包含標記線粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。本品是一種氧化型的紅色熒光染料(Ex=579 nm,Em=599 nm),只需簡單孵育細胞,即可被動運輸穿過細胞膜并直接聚集在活性線粒體上。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

MitoTracker® Red CMXRos

線粒體紅色熒光探針

40741ES50

50 µg

425.00

產(chǎn)品描述

MitoTracker® Red CMXRos線粒體紅色熒光探針是一種細胞滲透型的X-rosamine衍生物,包含標記線粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。本品是一種氧化型的紅色熒光染料(Ex=579 nm,Em=599 nm),只需簡單孵育細胞,即可被動運輸穿過細胞膜并直接聚集在活性線粒體上。一旦線粒體被染色后,還能根據(jù)后續(xù)實驗的需求進行固定(醛類固定劑如甲醛)和透化(醛類去污劑如Triton X-100),探針依然維持在細胞內。本品適合雙標實驗,因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。

雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123,也能很容易的聚集在功能線粒體上,但是一旦線粒體膜電位喪失即會被洗掉,從而在一些需要細胞進行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實驗中,使其應用大受限制。

產(chǎn)品性質

CAS號(CAS NO.)

167095-09-2

分子式(Formula)

C32H32Cl2N2O

分子量(Molecular weight)

531.52

外觀(Appearance)

紫色固體

激發(fā)波長(Ex)

579 nm

發(fā)射波長(Em)

599 nm

結構式(Structure)

image.png

運輸和保存方法

室溫運輸;-20℃避光干燥保存,有效期1年。

使用方法

1. 儲存液的配制

本品是以粉末形式提供,使用前需將本品回溫至室溫。

之后使用細胞培養(yǎng)級別的無水DMSO(如Yeasen,貨號:60313ES60)將其充分溶解至終濃度1 mM。

本品M. Wt.= 531.52 g/mol,換算下來,50 µg粉末只需加入94 µL DMSO即可得到1 mM儲存液。

可根據(jù)單次的使用量將儲存液分裝后放到-20℃避光,避免反復凍融。

2. 工作液的配制


根據(jù)不同的實驗目的使用不同的探針濃度,以下的起始操作條件僅作參考,可根據(jù)細胞類型和其他的相關因素如細胞或組織的透化等進行適當調整。

用適當?shù)木彌_液或者細胞培養(yǎng)基稀釋1 mM儲存液至工作液濃度。一般推薦使用濃度為25-500 nM。對于后續(xù)需要做固定或透化的樣本,推薦工作濃度為100-500 nM,為了降低過度加載導致的潛在偽影和線粒體毒性,在不影響實驗結果的前提下應盡可能低濃度染色。另外,濃度過高也可能對其他細胞結構進行染色。

3. 染色及檢測

1)貼壁細胞的染色

培養(yǎng)皿/板內加入適量的培養(yǎng)基覆蓋蓋玻片進行爬片培養(yǎng)。當細胞長至所需豐度,吸除培養(yǎng)液,加入37℃預熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液。在所使用細胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時間需優(yōu)化)。染色結束后,使用新鮮培養(yǎng)液或緩沖液替換上述染色液,即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標儀下讀數(shù)。或者進行后續(xù)的固定和透化步驟,見步驟4。

2)懸浮細胞的染色

離心收集細胞,吸除上清,利用37℃預熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液輕輕重懸細胞。在所使用細胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時間需優(yōu)化)。染色結束后,離心收集細胞,利用37℃預熱的新鮮培養(yǎng)液或緩沖液重懸細胞,被染色的細胞可用流式細胞儀、熒光酶標儀、熒光顯微鏡進行分析。

如果需要蓋玻片上固定化的細胞,那么可在鋪片前先用多聚賴氨酸(poly-D-lysine)包被載玻片或蓋玻片。

或者進行后續(xù)的固定和透化步驟,見步驟4。

4. 固定和透化

1)染色結束后,利用培養(yǎng)液或緩沖液清洗細胞;

2)小心吸走清洗液。換用新鮮配制且預熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養(yǎng)液進行細胞固定。經(jīng)驗證,本染料MitoTracker® Red CMXRos由含3.7%甲醛的*培養(yǎng)液于37℃孵育內皮細胞15 min能起到良好的固定效果。

3)清洗細胞:吸除固定液,用適當緩沖液沖洗細胞數(shù)次。

4)細胞透化(可選):

ICC等實驗需要細胞要做透化,則可將已固定的細胞直接加入含有去污劑如Triton X-100的緩沖液中孵育。透化結束后,用緩沖液清洗細胞即可進行后續(xù)ICC實驗。經(jīng)檢測,利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育內皮細胞10 min可以達到良好的透化效果。

另外,還可利用預冷的丙酮透化5 min,之后用PBS清洗細胞。經(jīng)驗證,即使后繼沒有進一步的抗體標記,丙酮透化處理也可降低背景信號。

注意事項

1DMSO有毒,使用時請小心操作。

2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3)本產(chǎn)品僅作科研用途!

HB211230




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