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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
12601ES03Hieff NGS™ DNA分選磁珠
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 12601ES03 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：2730更新時(shí)間：2022-03-21 16:24:48
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 12601ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠 | 12601ES03 | 1 mL | 296.00 |
12601ES08 | 5 mL | 986.00 | |
12601ES56 | 60 mL | 6286.00 | |
12601ES75 | 450 mL | 26186.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優(yōu)化過(guò)的緩沖體系，可用于二代測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中的DNA段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫(kù)試劑盒，和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文庫(kù)大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。2-8℃保存，效期一年。避免冷凍！
注意事項(xiàng)
1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。
4）進(jìn)行長(zhǎng)度分選時(shí)，初始樣品體積需≥100μL，不足時(shí)請(qǐng)用超純水補(bǔ)齊。樣品體積太小，將導(dǎo)致移液誤差增大，進(jìn)而影響分選的準(zhǔn)確性。
5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途！
使用方法
1. 準(zhǔn)備工作
將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
2. 長(zhǎng)度分選（雙輪法）
長(zhǎng)度分選操作流程如圖1所示，具體操作如下。
圖1雙輪分選操作流程
1）請(qǐng)渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
2）根據(jù)要求，參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠，渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
3）室溫孵育5 min。
4）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。
注意：轉(zhuǎn)移上清時(shí)，請(qǐng)殘留2 μL液體于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影響分選效果。
舉例：當(dāng)初始體積為100 μL，第一輪使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推薦吸出178 μL的上清。
5）參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
6）渦旋混勻或移液器吹打10次混勻，室溫靜置5 min。
7）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。
8）保持離心管始終處于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。
9）重復(fù)步驟8。
10）保持離心管始終處于磁力架中，開(kāi)蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。
注意：切記磁珠不要干燥時(shí)間太久，磁珠干燥過(guò)度將影響純化效果。
11）將離心管從磁力架中取出，加入適量ddH2O（≥20 μL），渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻，室溫孵育5 min。
12）將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后（約5 min），小心吸取上清至干凈的管中，即完成分選。
3. DN片段分選參考條件
通過(guò)超聲法將小牛胸腺DNA進(jìn)行片段化，制備100-1000 bp的Smear片段，根據(jù)表1進(jìn)行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進(jìn)行分析（圖2）。
表1磁珠文庫(kù)分選推薦比例
DN片段大小 | 250-350 bp | 320-420 bp | 450-550 bp | 550-700 bp | 700-900 bp | 800-1000 bp |
第一輪體積比（Beads:DNA） | 0.80× | 0.70× | 0.60× | 0.55× | 0.50× | 0.45× |
第二輪體積比（Beads:DNA） | 0.20× | 0.20× | 0.20× | 0.15× | 0.15× | 0.15× |
注：表中“×"表示樣品DNA體積。如文庫(kù)插入片段長(zhǎng)度為250 bp，樣品DNA體積為100mL，則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL；第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進(jìn)行片段分選
HB211123
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