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GMP-gradeT7聚合酶 T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • GMP-grade 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):909更新時間:2025-02-07 13:53:08

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www.yeasen.com

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10 KU
貨號 10613ES92 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
T7聚合酶 T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶,以含有T7啟動子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’)的雙鏈DNA為模板,以NTP為底物,合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。
產(chǎn)品介紹

T7聚合酶 T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)-GMP-grade

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

T7聚合酶 T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)GMP-grade

10613ES92

10 KU

1955

10613ES97

50 KU

8655

10613ES98

500 KU

74855

10613ES99

5000 KU

詢價

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶,以含有T7啟動子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’)的雙鏈DNA為模板,以NTP為底物,合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板,因此線性質粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。

注:G*RNA轉錄的第一個堿基。

本品是按照GMP工藝要求生產(chǎn),產(chǎn)品以無菌液體形式提供。

產(chǎn)品性質

來源(Source)

重組E. coli

最適溫度(Optimum Temperature)

37℃

宿主核酸殘留Host nucleic acid residue

<10 fg/U

宿主蛋白殘留Host protein residue

<50 ppm

病原體(HBV/ HCV/HIV)檢測

無檢出

RNA酶殘留(RNase residue

陰性

內(nèi)毒素殘留Endotoxin residue

<0.05EU/1000U

支原體檢測Mycoplasma detection

無檢出

無菌檢測Sterility testing

無檢出

儲存緩沖液(Storage Buffer)

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100,50%v/v)甘油pH7.9@25℃

活性單位定義(Unit Definition)

在 37℃、pH8.0 的條件下,1 h內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。

注:具體產(chǎn)品質檢數(shù)據(jù)及更多指標請查看批次質檢報告

產(chǎn)品組分

編號

組分

產(chǎn)品編號/規(guī)格

10613ES92

(10 KU)

10613ES97

(50 KU)

10613ES98

(500 KU)

10613ES99

(5000 KU)

10613-A

T7 RNA polymerase (1 KU/μL)

10 μL

50 μL

500 μL

5 mL

10613-B

10×Transcription Buffer

100 μL

500 μL

1 mL×5

10 mL×5

注:10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl2100 mM DTT,但不含有NTP,如需請購買本公司NTP set solution 10133。

產(chǎn)品應用

1. 單鏈 RNA合成(包括mRNA,siRNA,gRNA等各類RNA前體,以及同位素標記或非同位素標記的RNA探針)

2. 以(Cap analog)為引物合成Capped mRNA

運輸和保存方法

干冰運輸。-20℃保存,有效期一年。

應用實例

1、按下列體系配制反應體系

組分

體積(μL)

終濃度

10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus)

2

CTP/GTP/ATP/UTP (100 mM each)

0.4 each

2 mM each

T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)

0.5-1

-

RNase inhibitor (40 U/μL)

1

-

RNase free H2O

Up to 18

-

模板DNA

2 (100 ng-1μg)

-

. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亞精胺,亞精胺濃度過高會引起DNA模板沉淀。

. Buffer和水建議放置到室溫,然后開始使用,反應于室溫下配制,防止溫度低引起亞精胺沉淀高濃度DNA模板。

.若轉錄長度< 100 nt,模板投入量可增加至2 μg。

. RNase inhibitor (40 U/μL)請購買本公司產(chǎn)品10603。

.為了特定區(qū)域的有效轉錄,建議在其區(qū)域下游把模板DNA預先切成平端或5′突出末端。

2、37℃反應1-2 h(若轉錄長度≤ 100 nt,增加時間至4-8 h)。

3、反應結束后,使用2 U DNaseⅠ(無RNase)37℃15 min去除DNA模板。

4、轉錄產(chǎn)物純化體外轉錄產(chǎn)物可選用RNA Cleaner磁珠進行純化(12602),以去除蛋白、鹽離子和其他雜質。也可以采用酚/氯仿純化法(具體操作步驟可聯(lián)系Yeasen索?。?。

注意事項

1、DNA模板的種類:推薦使用含T7啟動子的線性化質粒和PCR產(chǎn)物作為模板。

2、轉錄模板的純度會顯著影響體外轉錄反應。在質粒DNA抽提過程中殘留的RNase A會顯著影響轉錄RNA的質量。通過酚-氯仿抽提的質粒DNA為最佳模板;PCR產(chǎn)物建議采用膠回收純化后使用。

3、20 μL反應體系中加入0.02 U熱穩(wěn)定無機焦磷酸酶可顯著提高轉錄產(chǎn)量。

4為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。



HB21
1021





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