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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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18461ES60磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 18461ES60 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):640更新時間:2022-07-07 16:24:05

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000 T
貨號 18461ES60 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥
磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測的前處理。采用*的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系,可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主DNA。
產(chǎn)品介紹

  • 產(chǎn)品信息

    產(chǎn)品名稱

    產(chǎn)品編號

    規(guī)格

    價格(元)

    MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit

    磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒(瓶裝)

    18461ES25

    25 T

    425.00

    18461ES60

    100T

    1,395.00

    產(chǎn)品描述

    MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測的前處理。采用*的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系,可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主細(xì)胞殘留DNA。

    該前處理試劑盒可與多種宿主細(xì)胞DNA殘留qPCR法)檢測試劑盒配合使用,包括CHO宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41301)、HEK293宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41302)、Vero宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41303)和E.coli殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41304)。

    產(chǎn)品組分

    類別

    組分編號

    組分名稱

    產(chǎn)品編號/規(guī)格

    18461ES25(25 T)

    18461ES60(100 T)

    Part I

    18461-A

    蛋白酶K(20 mg/mL)

    0.5 mL/支×1支

    1 mL/支×2支

    Part Ⅱ

    18461-B

    磁珠懸浮液

    0.5 mL/支×1支

    1 mL/支×2支

    18461-C

    裂解液

    2.5 mL/瓶×1瓶

    10 mL/瓶×1瓶

    18461-D

    結(jié)合液

    10 mL/瓶×1瓶

    40 mL/瓶×1瓶

    18461-E

    洗滌液A*

    6 mL/瓶×1瓶

    (需加9 mL乙醇)

    24 mL/瓶×1瓶

    (需加36 mL乙醇)

    18461-F

    洗滌液B*

    3 mL/瓶×1瓶

    (需加12 mL乙醇)

    12 mL/瓶×1瓶

    (需加48 mL乙醇)

    18461-G

    洗脫液

    2.5 mL/瓶×1瓶

    10 mL/瓶×1瓶

    Part Ⅲ

    18461-H

    糖原

    225 μL/支×1支

    900 μL/支×1支

    18461-I

    Poly A鉀鹽

    150 μL/支×1支

    600 μL/支×1支

    運(yùn)輸和保存方法

    Part I組分室溫運(yùn)輸,4℃可保存1年,長期保存于-20℃。

    Part II組分室溫運(yùn)輸,室溫保存,有效期1年。

    Part Ⅲ 組分冰袋運(yùn)輸,-20℃保存1年。

    注意事項

    1. 注意觀察常溫保存溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時),可37℃水浴至溶液澄清,避免影響使用效果。
    2. 洗脫時可能存在磁珠殘留,吸取樣本時應(yīng)盡量避免吸入磁珠。

    3. 處理樣本及加樣時,勤換槍頭,避免交叉污染。

    4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

    5. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

    實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備


    1. 自備設(shè)備和試劑:磁性分離架、杭州奧盛Auto-
    Pure32A核酸提取儀或其他全自動化提取儀,水浴鍋或金屬浴,離心機(jī),漩渦振蕩器,1.5 mL離心管,無水乙醇等。
    2. 使用前,在洗滌液A*和洗滌液B*瓶中加入標(biāo)簽或說明書中注明體積的無水乙醇,充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。每次使用后將瓶蓋蓋緊,以保持瓶中的乙醇含量。

    一、手工提取操作方法

    1. 樣本處理

    a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本,可用1×PBS(pH=7.4)對樣本進(jìn)行適當(dāng)比例稀釋后提取對樣本進(jìn)行稀釋是為了保證檢測的準(zhǔn)確性,使樣本的檢測值在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi),通??煽紤]進(jìn)行100倍稀釋)

    b. 待測樣本為干粉的,可用ddH2O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

    c. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的,可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

    2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中,加入100 μL裂解液,10 μL蛋白酶K,渦旋混勻10 sec。

     【注】:樣本蛋白濃度0-100 mg/mL,蛋白酶K用量為10 μL,樣本蛋白濃度100-200 mg/mL,蛋白酶K用量為20 μL。

    3. 60℃孵育20 min。

    4. 孵育完成后,加入400 μL結(jié)合液、9 μL糖原、6 μL Poly A鉀鹽渦旋混勻。  

    5. 加入20 μL磁珠,渦旋混勻后,放置10 min,每隔3 min渦旋混勻10 sec。

     【注】:磁珠使用前需渦旋混勻,保證磁珠*重懸。在一次性加樣4-5次后,建議再次混勻后再行加樣。

    6. 短暫離心后,將離心管置于磁力架上靜置1-2 min,待磁珠*吸附,小心吸液體。

    7. 加入500 μL洗滌液A(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),振蕩或渦旋混勻,確保磁珠分散,離心管壁無聚集磁珠。

    8. 短暫離心后,將離心管置于磁力架上靜置1-2 min,待磁珠*吸附,小心吸取液體。

    9. 加入500 μL洗滌液B(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),振蕩或渦旋混勻,確保磁珠分散,離心管壁無聚集磁珠。

    10.短暫離心后,將離心管置于磁力架上靜置1-2 min,待磁珠*吸附,小心吸取液體。

    11.為保證盡量吸出殘留液體,可將離心管快速離心10 sec后,置于磁力架上用10 μL移液器吸出殘留液體。

    12.打開管蓋,室溫放置3 min直至乙醇*揮發(fā)。觀察到磁珠表面無反光或出現(xiàn)裂隙即表明乙醇已揮發(fā)*。

    13.將離心管從磁力架上取下,加入50-100 μL 65℃預(yù)熱的洗脫液,振蕩混勻,短暫離心后,65℃孵育5 min,期間可振蕩混勻1次。

    14.短暫離心后,將離心管放置于磁力架上靜置2 min,待磁珠*吸附,小心將DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,保存于-20℃,長期保存需放置于-80℃。


    二、半自動化提取操作方法
    配套自動化儀器使用,以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例(如要配套其他主流自動化儀器使用,程序可向翌圣生物科技(上海)股份有限公司獲?。?/span>

    1. 樣本處理

    a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本,可用1×PBS(pH=7.4)稀釋100倍或1,000倍后提取。

    b. 待測樣本為干粉的,可用ddH2O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

    c. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的,可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

    2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中,加入100 μL裂解液,10 μL蛋白酶K,渦旋混勻10 sec。

    【注】:樣本蛋白濃度0-100 mg/mL,蛋白酶K用量為10 μL,樣本蛋白濃度100-200 mg/mL,蛋白酶K用量為20 μL。

    3. 60℃孵育20 min,即為預(yù)處理樣本,待用。

    4. 按照下表向96孔深孔板中加入相應(yīng)試劑(以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例):

    板的名稱

    位置

    試劑名稱

    用量/孔

    樣品處理板

    V1

    預(yù)處理樣本

    200 µL

    結(jié)合液

    400 µL

    糖原

    9 µL

    Poly A鉀鹽

    6 µL

    漂洗板

    V2

    洗滌液A*

    500 µL

    洗滌板/磁珠板

    V3

    磁珠懸浮液

    20 µL

    洗滌液B*

    500 µL

    洗脫板

    V6

    洗脫液

    50-100 µL

    【注】:磁珠懸浮液使用前需在渦旋混勻儀上充分重懸或充分顛倒混勻,在一次性加樣4-5次后,建議再次混勻后再行加樣。

    5. 按照提取儀的位置,正確安放上述96孔預(yù)裝板,并放置96深孔磁棒套。

    6. 運(yùn)行如下程序,程序結(jié)束后,將洗脫轉(zhuǎn)移至新的離心管中,溶液可置于-20℃短期保存,-80℃長期保存。

    奧盛Auto-Pure32A的提取儀器的提取程序

    步驟

    孔位

    混合時間(min)

    吸磁時間(sec)

    等待時間(min)

    容積(μL)

    混合速度(1-10)

    溫度(℃)

    混合位置(0-100%)

    混合幅度(1-100%)

    吸磁位置(0-100%)

    吸磁速度(1-10)

    移磁珠

    3

    0.2

    60

    0

    500

    5

    /

    0

    80

    0

    1

    結(jié)合

    1

    15

    90

    0

    600

    5

    /

    0

    80

    0

    1

    清洗1

    2

    1

    60

    0

    500

    8

    /

    0

    80

    0

    1

    清洗2

    3

    1

    60

    4

    500

    8

    /

    0

    80

    0

    1

    洗脫

    6

    8

    90

    0

    100

    10

    65

    0

    80

    0

    1

    棄磁珠

    3

    0.2

    0

    0

    500

    5

    /

    0

    80

    0

    1

    HB220413





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