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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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12221ESHieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit fo
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 12221ES 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：164更新時(shí)間：2025-02-07 13:51:26
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina V2是針對(duì)Illumina®測(cè)序平臺(tái)專(zhuān)業(yè)開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)的新一代DNA甲基化建庫(kù)試劑盒，在前一代建庫(kù)試劑盒的基礎(chǔ)上，改善了接頭連接效率，并采用了更加新型的高保真酶，顯著提高擴(kuò)增均一性和保真性。適用于各種經(jīng)Bisulfite處理的樣本類(lèi)型，包括gDNA、FFPE DNA、cell free DNA (cfDNA)、ChIP DNA等，可以滿(mǎn)足Bisulfite處理后的10 pg~250 ng DNA樣本建庫(kù)。該試劑盒可兼容短至40 bp的DNA樣本。本產(chǎn)品不僅更加經(jīng)濟(jì)，同時(shí)也提供了簡(jiǎn)便快速的建庫(kù)流程，一般在2小時(shí)左右可以完成正常建庫(kù)。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。所有組分-20 °C保存，有效期1年。
注意事項(xiàng)
一、關(guān)于操作
1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 請(qǐng)于使用前將試劑盒各組分置于室溫解凍。解凍后上下顛倒數(shù)次充分混勻，短暫離心后置于冰上待用。
3. 配制各步驟反應(yīng)液時(shí)推薦使用移液器吹打混勻或輕輕振蕩，劇烈振蕩可能會(huì)造成文庫(kù)產(chǎn)出下降。
4. 為避免樣品交叉污染，推薦使用帶濾芯的槍頭，吸取不同樣品時(shí)請(qǐng)更換槍頭。
5. 推薦在帶熱蓋的PCR儀中進(jìn)行各步驟反應(yīng)，使用前應(yīng)預(yù)熱PCR儀至反應(yīng)溫度附近。
6. PCR產(chǎn)物因操作不當(dāng)極容易產(chǎn)生氣溶膠污染，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。推薦將PCR反應(yīng)體系配制區(qū)和PCR產(chǎn)物純化檢測(cè)區(qū)進(jìn)行強(qiáng)制性的物理隔離；使用專(zhuān)用的移液器等設(shè)備；并定時(shí)對(duì)各實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行清潔（使用0.5%次氯酸鈉或10%漂白劑進(jìn)行擦拭清理），以保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境的潔凈度。
7. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
案例展示
a. gDNA樣本建庫(kù)示例
圖 2：human gDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫(kù)示意圖
注：50 ng human gDNA使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后，全部投入建庫(kù)，PCR 擴(kuò)增10 cycle 得到的文庫(kù)產(chǎn)量約為20×58.2 ng；
b. FFPE DNA樣本建庫(kù)示例
圖 3：FFPE DNA 樣本bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫(kù)示意圖
注：50 ng FFPE DNA 使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后，全部投入建庫(kù)，PCR 擴(kuò)增 10 cycle 得到的文庫(kù)產(chǎn)量約為 20×74.8 ng；
c. cfDNA樣本建庫(kù)示例
圖 4：cfDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫(kù)示意圖
注：10ng cfDNA 使用 ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后，全部投入建庫(kù)，PCR 擴(kuò)增 11 cycle 得到的文庫(kù)產(chǎn)量約為 20×54.4 ng；
常見(jiàn)問(wèn)題
DNA 文庫(kù)產(chǎn)量偏低，出現(xiàn)接頭二聚體，大片段等問(wèn)題，可以考慮從如下方面進(jìn)行優(yōu)化：
a)文庫(kù)產(chǎn)量偏低，應(yīng)考慮樣本溶液中含有酶抑制劑組分，建議再次純化；
b)文庫(kù)出現(xiàn)接頭二聚體，推薦在互補(bǔ)鏈延伸之后進(jìn)行2輪純化，在第一輪純化后用50 μL洗脫，然后加入1.2×beads (60 μL)進(jìn)行再次純化；
c)對(duì)于文庫(kù)大片段的出現(xiàn)，考慮是過(guò)度擴(kuò)增引起，可以適當(dāng)減少擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。
