中華枝睪吸蟲PCR試劑盒

Clonorchis sinensis

產品及特點

中華枝睪吸蟲（Clonorchis sinensis）簡稱華支睪吸蟲，又稱肝吸蟲（liver fluke），華肝蛭。成蟲寄生于人體的肝膽管內，可引起華支睪吸蟲病 （Clonorchiasis•），又稱肝吸蟲病。中國超過 1200 萬人感染肝吸蟲， 由于 肝吸蟲感染早期并無明顯不適癥狀，基本上不可能知道感染，肝吸蟲寄生在人 體肝臟的膽管內大量繁殖，引起膽汁堵塞、膽管發(fā)炎、肝纖維化、肝硬化，還 有資料顯示肝吸蟲感染與膽管癌、肝癌的發(fā)生有密切關系。因此中華枝睪吸蟲 的快速診斷具有重要意義。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增中華枝睪吸蟲。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

中華枝睪吸蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。