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上海信裕生物科技有限公司
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當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次猴D型逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒

猴D型逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒

參   考   價: 1990 1790

訂  貨  量: 1-4  件 ≥5  件

具體成交價以合同協議為準

產品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質生產商

所  在  地上海

更新時間:2020-08-12 16:25:03瀏覽次數:488次

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供貨周期 一周 規(guī)格 50T
貨號 XY-0671 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁
主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。
猴D型逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據其理化性質分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經組織。

猴D型逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒

Simian Type-D Retrovirus(SRV)

產品及特點

猴 D 型逆轉錄病毒(Simian Type D Retrovirus, SRV)會引起猴獲得性免疫 缺陷綜合征,也就是猴艾滋病,該病在非洲的爆發(fā)導致了黑猩猩種群數量的下降, 患病的黑猩猩有類似晚期人艾滋病患者的器官及組織損壞的癥狀,受感染的黑猩 猩有比未被感染的高 10 至 16 倍的死亡風險,被感染的雌性的生育力下降,還可 能將病毒傳給它們的幼兒,這些幼兒死亡率也比未受感染的雌性幼兒更高。該病 毒對人類研究艾滋病毒具有重要意義,為此本公司基于熒光定量 PCR 原理開發(fā)了 本產品。它具有下列特點:

1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。

2.根據猴 D 型逆轉錄病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間 轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產品只能用于科研,不能用于臨床。

猴D型逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號

成  份

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋)

試劑三

超純水 

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

猴 D 型逆轉錄病毒RT-PCR 引物 混合液 

100 μL(白蓋)

試劑五

猴 D 型逆轉錄病毒RT-PCR 陽性 對照(1×10E8 拷貝/μL) 

50 μL(黃蓋)

試劑六 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) 20 次(1mL,綠蓋)
試劑七

使用手冊 

1 份

運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二、設置 RT-PCR 反應(20μL 體系)

3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

樣品

陽性對照

陰性對照

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

猴 D 型逆轉錄病毒RT-PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各12.5 μL

 

 

超純水 

 

12.5 μL

 

猴 D 型逆轉錄病毒RT-PCR 陽性對照 的 100 倍稀釋液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應參數為:

過程

溫度

時間

逆轉錄 

42℃

60 分鐘 

預變性

94℃   

3 分鐘

PCR 反應 (35 個循環(huán))

94℃  

30 秒

56℃ 30 秒

72℃

40 秒

 延伸  72 7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產物的情況下,才有必要分析樣品的實驗結果, 如果有擴增產物則為陽性,如果無則為陰性。

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