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科研小白如何預(yù)防細胞污染?

閱讀:2557      發(fā)布時間:2018-11-19
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培養(yǎng)細胞

<培養(yǎng)細胞>

  培養(yǎng)細胞總是會讓科研小白茶飯不思,擔驚受怕,即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥,也會牽腸掛肚,心不在焉。

  萬一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光,嫌棄的嘴角,還有因為污染造成其他戰(zhàn)友的驚恐不安,想想都怕怕。

  師姐A:師妹?。?!讓你養(yǎng)著玩的細胞又污染了。

  師姐B:納尼?!

  師姐C(火速趕往案發(fā)現(xiàn)場):我的心肝寶貝細胞你還好么?

  師兄A:天?。。。〔⒅码娕保?ldquo;親愛的,晚上不能陪你了,新來的師妹細胞又污染了,我又要給培養(yǎng)箱滅菌了”。

  師妹:我是罪人,好丟臉。像我這樣的小白如何避免細胞污染呢?

  “師妹過來,師兄手把手教你,如何預(yù)防細胞污染。” 想當年師兄就是靠養(yǎng)細胞培養(yǎng)起來的重度潔癖。

  常規(guī)操作不再贅述,主要安利以下內(nèi)容:

  1. 仔細閱讀所在實驗室的細胞室綜合管理制度,嚴格遵守制度。

  2. 細胞室室內(nèi)滅菌可以交叉進行,熏蒸、臭氧、紫外、新潔爾滅。

  3. 根據(jù)細胞室空間,限制同時進入人數(shù)。

  4. 超凈工作臺使用前后,紫外燈照射滅菌。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒(小竅門:超凈臺使用完畢后,可以用酒精噴灑桌面,再用抽紙擦干凈,比用酒精棉球干凈多嘍!使用前不建議這種方法擦拭)。物品放入超凈臺前均應(yīng)酒精噴灑消毒,超凈臺內(nèi)嚴禁堆放過多物品,以免影響風路平衡。

  5. 水浴鍋使用完畢后及時將水倒掉,并保持鍋內(nèi)干燥。常用水浴鍋時,每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次,以防細菌滋生。

  6. 從培養(yǎng)箱取放細胞前,用酒精清潔雙手(或手套),盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。

  7. 培養(yǎng)箱用水每周更換一次,更換前托盤用酒精擦拭、紫外燈照射30分鐘殺菌。

  8. 滅完菌槍頭,烘箱烘干后存放,保質(zhì)期1周。逾期需重新滅菌使用。

  9. 培養(yǎng)液、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用,應(yīng)單獨分裝使用,以免交叉污染,也便污染后自查原因。

  10.在使用0.22μm的微孔濾膜過濾自配溶液時,注意無菌操作規(guī)范,以防濾液污染。特殊情況可檢菌安全后使用。

  11.除特殊要求外,建議培養(yǎng)基中添加雙抗,算是送給細胞的守護神。

  12.防護服、口罩、手套缺一不可。隔壁細胞室負責人是韓國回來的博士,讓學(xué)生只戴手套操作,于是經(jīng)常聽他們說細胞掛了。

  13.操作前,準備好所有實驗所需物品,以減少走動;物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方,同時空留足夠操作空間。

  14.操作時,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,移至操作區(qū)外圍,盡量不要從開口容器上經(jīng)過。

  15.使用移液槍時,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導(dǎo)致細菌滋生。

  16.先取試劑、耗材,再取移液槍、安槍頭。很多人習慣先安槍頭,然后去拿試劑、耗材,殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染。

  17.向廢液缸打廢液時,需輕柔,以免造成水花四濺,污染槍頭、槍體。實驗結(jié)束,及時倒掉廢液缸垃圾,沖洗之后噴灑酒精,放入超凈臺紫外照射殺菌。

  18.培養(yǎng)基滴在桌面時要及時用酒精棉球擦拭,切記不要等實驗做完再處理。因為那樣,你的臺面上就會留下一個印記,對于強迫癥的人來說,不!能!接!受!?。。?/p>

  19.凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復(fù)蘇細胞時,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,水面不可超過凍存管蓋沿;不建議直接扔進水中,以免水滲入造成污染。

  20.一旦污染,及時處理,不到不得已不建議施救;查找原因,防止再犯。

  總的來說,防患未然比亡羊補牢強得多。操作過程中對于模糊不清的,寧愿認為是有菌的棄掉,也不要心存僥幸!

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