2023 05-15

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗中常見問題

一、轉(zhuǎn)染效率低影響轉(zhuǎn)染效率因素很多，主要因素有細(xì)胞培養(yǎng)物、血清、載體構(gòu)建、DNA質(zhì)量以及轉(zhuǎn)染技術(shù)等。1.沒有使用優(yōu)化條件：優(yōu)化陽離子脂質(zhì)體試劑和DNA的量。2.DNA-陽離子脂質(zhì)體試劑復(fù)合物在存在血清...

2023 05-08

血清的具體實驗作用你了解多少？

①有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。②是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。③提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。④...

2023 04-24

干細(xì)胞外泌體知多少？

2013年諾貝爾獎中，美國科學(xué)家詹姆斯·羅斯曼等三人發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞的囊泡運輸調(diào)控機制，外泌體是囊泡的其中一種。外泌體(exosomes)是一種能被機體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大...

2023 04-18

DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培養(yǎng)基到底啥差別？

DMEM高糖培養(yǎng)基DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來，目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞?？捎糜诙喾N哺乳動物原代細(xì)胞的培養(yǎng)，例如原代成纖維...

2023 04-11

原代細(xì)胞與細(xì)胞系怎么選擇？

原代細(xì)胞生長緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度...

2023 04-04

細(xì)胞培養(yǎng)實驗中培養(yǎng)液渾濁原因分析

培養(yǎng)基變渾濁的原因可能有如下幾點：1、細(xì)胞存在污染，污染早期可以見到細(xì)胞生長；2、不排除傳代時細(xì)胞密度過大，或者操作不當(dāng)導(dǎo)致多數(shù)細(xì)胞不貼壁，大量細(xì)胞漂浮。3、細(xì)胞破碎。細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7...

2023 03-31

在細(xì)胞實驗中血清熱滅活的作用和意義

一、血清滅活的目的是什么？1、血清熱滅活目的主要是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。2、實驗員曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進(jìn)行測定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有...

2023 03-28

常規(guī)培養(yǎng)基的配制流程介紹

1、計算稱量根據(jù)待檢樣品屬性計算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說明書進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；電子天平需開機預(yù)熱30min后使用，稱量過程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈...

2023 03-22

ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物（超敏）的操作步驟

ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物（超敏）可為使用辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)物的免疫印跡實驗提供明亮的信號和低皮克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價比...

2023 03-20

什么是牛血清白蛋白？

牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。應(yīng)用：牛血清白蛋白（BSA）在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，例如在WB實驗中加入BSA，通過...

2023 03-15

細(xì)胞培養(yǎng)基需要更換哪些指標(biāo)呢？

無論是原代培養(yǎng)還是細(xì)胞系的傳代培養(yǎng)，一旦培養(yǎng)開始，就要定期更換或補充培養(yǎng)基。如果細(xì)胞持續(xù)增殖，隨后遲早要進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對干不增殖的培養(yǎng)物，也需要定期更換培養(yǎng)基，因為細(xì)胞仍會代謝，培養(yǎng)基的某些成分會耗盡...

2023 03-07

動物細(xì)胞培養(yǎng)4大常用合成培養(yǎng)基

體外培養(yǎng)動物細(xì)胞已經(jīng)有近百年的歷史，但該技術(shù)真正得以廣泛應(yīng)用及各種類型組織細(xì)胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細(xì)胞體外生長需要的合成培養(yǎng)基的問世。合成培養(yǎng)基是對細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下...

2023 03-02

pH緩沖液的使用方法和配制保存

pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中，這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液...

2023 02-27

酪蛋白的作用

酪蛋白是哺乳動物包括母牛，羊和人奶中的主要蛋白質(zhì)，又稱：干酪素、酪朊、乳酪素。α-酪蛋白是哺乳動物的主要蛋白，人乳中沒有α-酪蛋白，以β-酪蛋白為主要酪蛋白形式。酪蛋白對幼兒既是氨基酸的來源，也是鈣和...

2023 02-23

影響細(xì)胞培養(yǎng)的有哪些因素？

環(huán)境因素1．無菌環(huán)境無毒和無菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。細(xì)胞在活體內(nèi)，解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵，但細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過程中，缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對微生物的防御能力和對有...

2023 02-21

細(xì)胞培養(yǎng)可以分哪幾類？

細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為...

2023 02-15

培養(yǎng)細(xì)胞時，胎牛血清提供什么幫助？

1.提供細(xì)胞生長所需的天然激素或天然生長因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等，能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白（Fetuin）...

2023 02-14

胎牛血清在實驗中起到什么作用？

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的...

2023 02-13

實驗室質(zhì)量控制常用方法

一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控質(zhì)控過程通常的做法是實驗室直接用合適的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)樣品作為監(jiān)控樣品，定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對樣或密碼樣的形式，與樣品檢測以相同的流程和方法同時進(jìn)行，檢測室完成后上報檢測結(jié)...

2023 02-10

培養(yǎng)基配制操作步驟

1、計算稱量根據(jù)待檢樣品屬性計算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說明書進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；電子天平需開機預(yù)熱30min后使用，稱量過程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈...