H4IIE-RFP?細胞?
規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點：細胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝：內(nèi)層無菌自封袋；專用防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書
細胞來源：ATCC、sciencell、ICLC
貨期：2-3周
運輸方式：快遞運輸
售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時聯(lián)系銷售人員，我們將盡快為您解決

H4IIE-RFP細胞

1，簽收細胞后狀態(tài)穩(wěn)定可以先凍存留種
2，傳代當(dāng)天用普通培養(yǎng)基，不要加嘌呤霉素，待細胞培養(yǎng)1-2天，密度達到40%后再加
3，階梯式加藥：待到細胞密度40%以上后，初次加1ug/ml維持觀察2天左右，細胞狀態(tài)無影響再加到1.5-2ug/ml，觀察2天無影響后，最后加到3ug/ml
4，復(fù)蘇后，待細胞狀態(tài)穩(wěn)定，密度40%以后，直接加3ug/ml，梯度加藥主要是針對第一次使用嘌呤霉素的時候，以免不同實驗室的藥物濃度和活性差異較大，第一次直接使用高濃度把細胞狀態(tài)弄受損
5，凍存后復(fù)蘇初期，可以用15%血清，讓狀態(tài)盡快穩(wěn)定，然后再降為10%

GFP 和 RFP 分別轉(zhuǎn)染的綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白 直接在熒光顯微鏡下 即可觀察
LUC是螢火蟲熒光素酶 需要加底物（D-熒光素鈉鹽）發(fā)光  激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nM

細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作。
將細胞懸液移入離心管，1000rpm/min 離心5分鐘。上清培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。離心下來的細胞T25瓶中加培養(yǎng)液6-8ml，混勻后放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。
傳代方法：
細胞生長至1X106/ml時（一般情況），將細胞懸液移入離心管800-1000rpm/min離心5分鐘，然后棄上清，加新鮮培養(yǎng)液混勻，1瓶分成3瓶（或6瓶-10瓶），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)