血清鐵濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

分光光度法 50 管/48 樣

血清鐵濃度檢測(cè)試劑盒 離子系列

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵，該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。

測(cè)定原理：

亞硫酸鈉還原血清Fe³⁺生成成Fe²⁺，F(xiàn)e²⁺進(jìn)一步與 2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色，在 520nm 處有吸收峰，測(cè)定該波長(zhǎng)光吸收值即可計(jì)算血清鐵含量。

組成：

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前配制，加入 20 ml 蒸餾水充分溶解。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前配制，加入 625μl 冰醋酸，加入 20 ml 蒸餾水充分溶解。標(biāo)準(zhǔn)液：液體 1ml×1 支（EP 管），10 μmol/L Fe3+標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml 玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。

測(cè)定：

分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 520 nm，蒸餾水調(diào)零。

標(biāo)準(zhǔn)液解凍：提前取出標(biāo)準(zhǔn)液，置于室溫下充分解凍后混勻。

空白管：取EP 管，依次加入 400 μl 蒸餾水，400 μl 試劑一，400 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入 200 μl 氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液 700 μl，加入 1ml 玻璃比色皿，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 空白管。

標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管，依次加入 400 μl 標(biāo)準(zhǔn)液，400 μl 試劑一，400 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入 200 μl 氯仿，充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液 700μl，加入 1ml 玻璃比色皿，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

測(cè)定管：取 EP 管，依次加入 400 μl 血清，400 μl 試劑一，400 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴 5min，自來(lái)水冷卻。加入 200 μl 氯仿，充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液 700 μl，加入 1ml 玻璃比色皿，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 測(cè)定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

血清鐵濃度計(jì)算公式：

血清鐵含量(μmol /dL)=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總

= (A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液：10 μmol/L Fe3+標(biāo)準(zhǔn)液；V 總：標(biāo)準(zhǔn)液總體積 1ml；1 dL=0.1 L。

注意事項(xiàng)：

1．血清鐵含量少，所用器皿（EP 管）需要注意，避免被鐵污染。

2．試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑當(dāng)天使用完畢。

3. 最di檢出限為 1μmol/L。

血清鐵濃度檢測(cè)試劑盒 離子系列