血磷濃度檢測(cè)試劑盒（UW5-1, 50T/48S）說(shuō)明書

分光光度法 50 管/48 樣

血磷濃度檢測(cè)試劑盒 離子系列

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

血磷主要指血中的無(wú)機(jī)磷，以無(wú)機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切，在以 mg/dL 表示時(shí)，二者的乘積(［Ca］×［P］)為 30～40。當(dāng)(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35 則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到維生素 D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。

測(cè)定原理：

去除血清中有機(jī)磷后，無(wú)機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被硫酸ya鐵還原后呈藍(lán)色，在 620nm 有光吸收；通過(guò)測(cè)定 620 nm 吸光度，計(jì)算血液中磷含量。

組成：

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前配制，依次加入 22 ml 蒸餾水充分溶解，再加入試劑二，充分混合。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體 1ml×1 支，0.02 m mol/L 無(wú)機(jī)磷，4℃保存。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml 玻璃比色皿和蒸餾水。

血磷濃度測(cè)定操作：

分光光度計(jì)預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 620 nm，蒸餾水調(diào)零。

取出標(biāo)準(zhǔn)液，室溫解凍。

血清預(yù)處理：吸取 50 μl 血清，加 950μl 試劑一，混勻后室溫 8000rpm，離心 10min，取上清液，待測(cè)。

空白管：取 1ml 玻璃比色皿，依次加入 250μl 蒸餾水，250μl 試劑一，500μl 試劑三，混勻后靜置 10min，于 620 nm 測(cè)定吸光度，記為A 空白管。

標(biāo)準(zhǔn)管：取 1ml 玻璃比色皿，依次加入 250μl 標(biāo)準(zhǔn)液，250μl 試劑一，500μl 試劑三，混勻后靜置 10min，于 620 nm 測(cè)定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

測(cè)定管：取 1ml 玻璃比色皿，依次加入 250μl 上清液，250μl 試劑一，500μl 試劑三，混勻后靜置 10min，于 620 nm 測(cè)定吸光度，記為A 測(cè)定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

血磷濃度計(jì)算：

血磷含量（m mol/dL）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×樣品稀釋倍數(shù)×V 樣總

=0.04×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液：0.02 mmol/L；樣品稀釋倍數(shù)：（50 μl 血清+950μl 試劑一）÷50 μl 血清=20；V 樣總：100 ml=0.1 L。

注意事項(xiàng)：

試劑三需臨用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用 3 天；

測(cè)定過(guò)程中，應(yīng)盡量避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞中有機(jī)磷酯進(jìn)入血清后可被酶水解而使得血清無(wú)機(jī)磷含量增高。

采血后宜盡早進(jìn)行血清磷測(cè)定，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響血清磷含量。

最di檢出限為 10μmol/L。

血磷濃度檢測(cè)試劑盒 離子系列