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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒是基于SP6 RNA 聚合酶的 RNA 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒，它利用含有 SP6 啟動(dòng)子的模版 DNA，以 NTP 為底物，從 SP6 啟動(dòng)子下游開(kāi)始合成與模版 DNA 中一條鏈互補(bǔ)的 RNA，簡(jiǎn)單快速獲得大量的 RNA 分子。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開(kāi)即用，只需提供含 SP6 啟動(dòng)子的 DNA 模板即可進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)。

2.單溶液預(yù)配液，減少加樣次數(shù)，避免了操作誤差，增加了可重復(fù)性。

3.模版 DNA 可以是線性化的質(zhì)粒 DNA，也可以是 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物。

4.可以合成的 RNA 的最佳長(zhǎng)度在 20 nt 到 2000 nt 之間。

5.產(chǎn)品配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，每 ug DNA 模版可以合成 2-6 ug RNA。

6.得到的 RNA 可以用于 RNA 結(jié)構(gòu)研究、核酶生物化學(xué)、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。

7.SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒足夠 50 次 20uL 的體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝材料

T7-SP6 體外轉(zhuǎn)錄預(yù)配液,2×0.5 mL0.5 mL 本色蓋

SP6 RNA 聚合酶-RI 混合液50 μL0.5 mL 紅 蓋

RNase-free 水1 mL1.5 mL 黃 蓋

使用手冊(cè)1 份無(wú)

保存和運(yùn)輸

低溫運(yùn)輸，-20℃保存, 有效期一年。

自備試劑

如果需要去除轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的 DNA 模板，則需要自備 RNase-free DNase、Tris 飽和酚、氯仿、微量核酸沉淀劑、RNase-free 75%乙醇（均可從本公司另購(gòu)）

疑難解答：

沒(méi)有 RNA 產(chǎn)物。最常見(jiàn)原因是模板有 RNase 污染，可用純化的 RNA 跟模板DNA 一起保溫，再檢測(cè)RNA 是否降解。還可以增加RNase Inhibitor 用量，本試劑盒緩沖液和酶混合液中有 RNase inhibitor，如果模板 RNase 污染嚴(yán)重，可能需要用戶補(bǔ)加RNase inhibitor。

2、RNA 產(chǎn)量低。最常見(jiàn)的原因是 DNA 模板。在轉(zhuǎn)錄序列的第一個(gè)和第二個(gè)堿基最好都是 G，在前 14 個(gè)堿基內(nèi)避免有U 存在。

3、RNA 長(zhǎng)度比預(yù)期的短?？赡苁悄０逍蛄兄杏蠸P6 RNA 聚合酶的終止序列?？梢愿挠?SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒（啟動(dòng)子也必須改成 SP6 啟動(dòng)子）。

4、RNA 長(zhǎng)度比預(yù)計(jì)的長(zhǎng)。SP6 RNA 聚合酶跟 Taq DNA 聚合酶一樣，有不依賴于模板的加尾功能，最多有一半的 RNA 可以帶一個(gè)或兩個(gè)堿基的尾巴。如果 RNA 長(zhǎng)度比預(yù)計(jì)的長(zhǎng)很多，使用的模板又是質(zhì)粒DNA，則可能是線性化不徹-底。

5、5’單磷酸還是三磷酸。如果使用 GTP，則得到的 RNA 是三磷酸，體外轉(zhuǎn)錄時(shí)如果保溫時(shí)間太長(zhǎng)（如 12 小時(shí)），則有 50%的三磷酸會(huì)變成單磷酸。如果在轉(zhuǎn)錄體系中加入 GMP，則 SP6 RNA 聚合酶將優(yōu)先使用GMP，所得 RNA 產(chǎn)物中5’端是單磷酸的比例將大大增加。

6、如何得到帶帽 RNA？需加入帶帽 NTP 類似物即可，本公司提供 5 種供選擇。

選擇我們的SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！