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北京諾博萊德科技有限公司

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714002×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量

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  • 北京諾博萊德科技有限公司
  • 2025-04-23 16:23:15
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【簡單介紹】

品牌 NobleRyder/諾博萊德 貨號 71400
規(guī)格 500次/5ml 供貨周期 現(xiàn)貨
主要用途 2×Universal probe qPCR Mix(UDG+) 應用領域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
2x Universal Probe qPCR Mix(UDG+)是探針法專用的qPCR試劑,為2x預混液,試劑中引入了dNTP/UDG防污染系統(tǒng),可消除擴增產(chǎn)物污染對qPCR的影響。適用于DNA或cDNA的靶序列檢測、基因表達分析、拷貝數(shù)分析、SNP分型等。
2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量

【詳細說明】

2x Universal Probe qPCR Mix (UDG+)


2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量 

目錄號:71400

產(chǎn)品內(nèi)容

Components

71400-500

500 rxns(20μl/rxn)

71400-2500

2500rxns(20μl/rxn)

2x Universal Probe qPCR Mix (UDG+)

1.25 ml x4

1.25 ml x20

RNase-Free H2O

5 ml

5 ml x5

保存條件

-20℃保存,有效期24個月。使用前,充分融解,輕輕顛倒混勻,短期使用可放在4℃,避免反復凍融。

產(chǎn)品簡介

2x Universal Probe qPCR Mix(UDG+)是探針法專用的qPCR試劑,為2x預混液,試劑中引入了dNTP/UDG防污染系統(tǒng),可消除擴增產(chǎn)物污染對qPCR的影響。適用于DNA或cDNA的靶序列檢測、基因表達分析、拷貝數(shù)分析、SNP分型等。

其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心優(yōu)化的Buffer體系,有效抑制非特異性擴增,可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量,獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結果,具有靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等特點。

預混液中已添加有通用型ROX,適用于各種qPCR儀,使用時不需要額外添加ROX來校正儀器。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物、探針、2 x Universal Probe qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應體系:(以20μl反應體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2 x Universal Probe qPCR Mix (UDG+)

10 μl

DNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.5 μl

0.25 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.5 μl

0.25 μM each

Probe (10μM)

0.5 μl

0.25 μM each

RNase free H2O

Up to 20 μl

Not applicable

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系,cDNA原液≤總反應體系的10%,基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同,可對模板進行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常引物濃度為0.25 μM,就可以得到較好的結果,反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進行調整。擴增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發(fā)生非特異性反應時,可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應體系。


3. qPCR反應程序

注意:

1) 本產(chǎn)品兼容性強,絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來說,二步法擴增特異性高,三步法擴增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實驗結果時,可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增。

2) 根據(jù)引物的Tm值進行退火&延伸(退火)溫度的設定;

3) 延伸(退火&延伸)時間的設置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調整。

4) 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定。

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2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量 

    
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