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等溫擴增技術(shù)（Isothermal Amplification）是一種在恒定溫度下高效擴增特定核酸序列的分子生物學技術(shù)。與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比，該技術(shù)無需熱循環(huán)儀，僅需簡單的恒溫設(shè)備即可完成擴增反應，具有操作簡便、反應快速、靈敏度高等顯著優(yōu)勢，這些特性使其在即時診斷領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應用潛力。在眾多等溫擴增技術(shù)中，LAMP（環(huán)介導等溫擴增）技術(shù)因其高靈敏度和強特異性而成為主流選擇。然而，該技術(shù)也存在明顯局限：其依賴4-6條特異性引物和Bst DNA聚合酶的復雜反應體系，在實際應用中容易產(chǎn)生非特異性擴增，導致假陽性結(jié)果，嚴重制約了其在臨床診斷中的應用可靠性。
最新研究表明，引入Tte UvrD Helicase可有效突破這一技術(shù)瓶頸。Tte UvrD Helicase源自嗜熱菌Thermus thermophilus，熱穩(wěn)定性強，具有的DNA解旋能力，可高效解開雙鏈DNA，適用于高復雜度模板的處理，顯著降低LAMP實驗中的非特異性擴增[1]。
圖1. Tte UvrD解旋酶在HDA擴增技術(shù)中的原理圖示意[2]
Tte UvrD Helicase在
LAMP反應中減少非特異擴增的原理
在LAMP反應中，高濃度引物（如FIP/BIP）容易形成引物二聚體或與非目標序列結(jié)合，導致非特異性擴增。Tte UvrD Helicase能夠主動解旋雙鏈DNA，包括由引物二聚體或非特異性退火形成的非目標結(jié)構(gòu)，從而顯著減少因引物錯誤配對或模板二級結(jié)構(gòu)引起的假陽性擴增，提高LAMP反應的特異性。
在此，我們向您推介翌圣生物全新研發(fā)的Tte UvrD Helicase（Cat#14572），該產(chǎn)品能在60–75℃高溫下保持高效活性，顯著提升等溫擴增技術(shù)的特異性和速度，避免非特異性擴增。該酶尤其適用于各種等溫擴增技術(shù)，如解旋酶依賴擴增（HDA）、環(huán)介導等溫擴增（LAMP）、重組酶聚合酶擴增（RPA）、滾環(huán)擴增（RCA）和鏈置換擴增（SDA）等。
新品，福利大放送！現(xiàn)開放5個免費試用名額，先到先得！只需掃描下方二維碼，聯(lián)系我們的專業(yè)工作人員，即可輕松申領(lǐng)試用產(chǎn)品，開啟高效科研之旅！
活動細則：
1、活動時間：即日起-5月31日；
2、活動名額有限，每位客戶限一套。
性能展示
翌圣Tte UvrD Helicase（Cat#14572）
LAMP體系中能有效消除非特異性
分別使用兩組LAMP引物配制LAMP反應體系，分別在每組體系中設(shè)置添加10 ng Tte UvrD Helicase實驗組和未添加Tte UvrD Helicase對照組，結(jié)果顯示翌圣Tte UvrD Helicase的引入能有效消除LAMP體系的非特異性擴增，且不影響陽性樣本的檢測。
無核酸外切酶、切口酶、RNase酶殘留
將20 ng Tte UvrD Helicase分別與核酸底物孵育，并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結(jié)果表明，翌圣的3個批次Tte UvrD Helicase均未檢測出核酸外切酶、切口酶或RNase 殘留，為您的實驗結(jié)果準確性與可靠性保駕護航。
圖3. Tte UvrD Helicase核酸外切酶、切口酶、RNase殘留檢測結(jié)果
產(chǎn)品推薦
參考文獻：
[1] Bokelmann L, Nickel O, Maricic T, et al. Point-of-care bulk testing for SARS-CoV-2 by combining hybridization capture with improved colorimetric LAMP[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 1467.
[2] Barreda-García S, Miranda-Castro R, de-Los-Santos-álvarez N, et al. Helicase-dependent isothermal amplification: a novel tool in the development of molecular-based analytical systems for rapid pathogen detection[J]. Analytical and bioanalytical chemistry, 2018, 410: 679-693.
