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NGS文庫(kù)構(gòu)建產(chǎn)品選擇指南YEASEN與NGS高通量測(cè)序是對(duì)傳統(tǒng)測(cè)序技術(shù)的革命性創(chuàng)新,大力推動(dòng)了科學(xué)技術(shù)的發(fā)展。Yeasen長(zhǎng)期以來(lái)一直對(duì)高通量測(cè)序技術(shù)保持高度關(guān)注。自2009年成立以來(lái),公司致力于分子酶的創(chuàng)新開(kāi)發(fā),結(jié)合自身多年分子酶研發(fā)經(jīng)驗(yàn),集結(jié)了在基因組學(xué)和生物信息學(xué)等領(lǐng)域有豐富經(jīng)驗(yàn)的科研人員組建了高通量測(cè)序研發(fā)團(tuán)隊(duì),成功推出了高通量測(cè)序上游樣本文庫(kù)制備的完整產(chǎn)品線(xiàn)。不僅可以提供的建庫(kù)試劑盒,同時(shí)還可以根據(jù)客戶(hù)的需求定制開(kāi)發(fā)測(cè)序相關(guān)產(chǎn)品。廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢測(cè)、科學(xué)研究等各個(gè)領(lǐng)域。公司注重產(chǎn)品品
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EdU系列熒光檢測(cè)產(chǎn)品-點(diǎn)亮你的視野
EdU系列熒光檢測(cè)產(chǎn)品------點(diǎn)亮你的視野!想做細(xì)胞增殖、細(xì)胞成像、流式分析、細(xì)胞示蹤、DNA損傷修復(fù)、病毒增殖活性檢測(cè)觀察怎么辦?免疫法、染料法、同位素法……免疫法的抗體太貴、染料法染色不清晰、同位素法太危險(xiǎn)……小翊來(lái)幫您,全新EdU系列熒光探針,點(diǎn)亮你的視野,讓你看的更清晰!背景介紹測(cè)定DNA合成情況是細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞毒性、DNA復(fù)制及修復(fù)、信號(hào)通路等研究方向常用方法之一,用到的檢測(cè)試劑主要是胸腺嘧啶核苷酸類(lèi)似物(BrdU、EdU),兩種試劑在檢測(cè)方面有一些不同之處。BrdU免疫 -
如何定量低豐度目的基因的表達(dá)(含詳細(xì)解決方法)
有時(shí)候,qPCR實(shí)驗(yàn)會(huì)成為阻礙你課題順利開(kāi)展的強(qiáng)勢(shì)攔路虎!看似簡(jiǎn)單的基因表達(dá)量差異驗(yàn)證,當(dāng)遇到低豐富表達(dá)的基因時(shí),也許就舉步維艱。模板獲取困難導(dǎo)致的RNA提取量少或RNA質(zhì)量不佳,即使選用蕞佳的試劑、篩選出良好的引物,也有可能qPCR定量得到的內(nèi)參基因CT值在18-20個(gè)cycle,而目的基因在31-35個(gè)循環(huán)。遇到這種情況,你是怎么解決的呢?qPCR在低豐度表達(dá)基因定量中的局限性基因的豐度是指基因在基因組中的拷貝數(shù)??煞譃楦哓S度,中等豐度和低豐度。低豐度是指目的基因在基因組中的拷貝數(shù)低,可簡(jiǎn)單 -
掌握這幾個(gè)影響因素,你的反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)就了
小翊君前幾期一直在和大家聊qPCR,今天我們開(kāi)啟一個(gè)新的話(huà)題,聊一聊反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)定義:反轉(zhuǎn)錄過(guò)程簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程,是對(duì)中心法則的重要修正和補(bǔ)充。中心法則通常會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)不同的表述,逆轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄,二者的本質(zhì)區(qū)別在于:反轉(zhuǎn)錄是在研究過(guò)程中人為提取RNA并以之為模板人工合成DNA的過(guò)程。逆轉(zhuǎn)錄是RNA病毒自主行為,以RNA為模板形成DNA的過(guò)程。前者發(fā)生在體外,后者發(fā)生在體內(nèi)。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的示意圖如下圖所示:反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程看似簡(jiǎn)單的反 -
牛血清白蛋白、免疫球蛋白G(IgG)、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白YEASEN(翊圣生物)致力于為診斷試劑公司和廣大科研用戶(hù)提供高品質(zhì)的牛血清白蛋白、免疫球蛋白G(IgG)、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白,系列產(chǎn)品如下:(一)牛血清白蛋白(BSA)牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)是牛血清中的一種球蛋白,又稱(chēng)第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5
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qPCR進(jìn)階攻略——帶你玩轉(zhuǎn)儀器設(shè)置!
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)是分子實(shí)驗(yàn)室常用的一項(xiàng)技術(shù)。持續(xù)關(guān)注小翊的應(yīng)該都掌握了高質(zhì)量cDNA的獲取方法,引物設(shè)計(jì)指南以及反應(yīng)體系的配制技巧(還未get的小伙伴戳文末鏈接),然而上機(jī)時(shí),發(fā)現(xiàn)和別人的反應(yīng)條件不一致卻又不敢動(dòng)儀器?本期小翊將帶你玩轉(zhuǎn)qPCR儀器的設(shè)置!目前市面上的qPCR儀器種類(lèi)五花八門(mén),但基本上儀器的設(shè)置都相對(duì)一致。我們以ABI7500為例進(jìn)行介紹。反應(yīng)板設(shè)置實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇:我們將實(shí)驗(yàn)命名為“Yeasen”,進(jìn)行“Quantitation:ΔΔCt”實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法選擇:如選用SYBRGre -
逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)做不好,是不是引物出了問(wèn)題?
實(shí)驗(yàn)室常用到的實(shí)驗(yàn):逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)人員通過(guò)體外模擬病毒復(fù)制過(guò)程,以提取的RNA為模板,使用逆轉(zhuǎn)錄酶催化,合成出與RNA互補(bǔ)的cDNA鏈。終構(gòu)建cDNA文庫(kù),并從中篩選所需的靶標(biāo)基因。BUT!小伙伴們做逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)時(shí),1)有沒(méi)有深究過(guò)RNA逆轉(zhuǎn)錄出的cDNA能不能真實(shí)反映出基因表達(dá)信息?2)做實(shí)驗(yàn)時(shí),有沒(méi)有發(fā)生過(guò)內(nèi)參做的很好,目的基因做不出的情況?如果有發(fā)生上述情況,那么需要重新評(píng)估逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。逆轉(zhuǎn)錄結(jié)果有效性的評(píng)定逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性的評(píng)定重要的是盡可能反映樣本中原始RNA模板的信息, -
測(cè)序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫(kù)出了問(wèn)題?!
HB190313測(cè)序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫(kù)出了問(wèn)題?!——從測(cè)序數(shù)據(jù)看文庫(kù)構(gòu)建高通量測(cè)序中的文庫(kù)構(gòu)建指的是在DNA兩端連接特定的接頭從而使其符合測(cè)序平臺(tái)要求的過(guò)程,在高通量測(cè)序過(guò)程中,文庫(kù)質(zhì)量直接影響終測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量,打個(gè)比方,如果文庫(kù)上機(jī)測(cè)序的濃度很低,樣本在FlowCell上擴(kuò)增所形成的DNA樣本簇就會(huì)很少,測(cè)序數(shù)據(jù)量也將減少,這就可能導(dǎo)致測(cè)序失敗,所以我們說(shuō)文庫(kù)的質(zhì)量控制和質(zhì)量評(píng)估也是NGS中的關(guān)鍵步驟。文庫(kù)如何質(zhì)控?評(píng)估文庫(kù)質(zhì)量的方法有哪些?n文庫(kù)質(zhì)控:文庫(kù)在上機(jī)之前都有會(huì)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè),質(zhì)