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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
11111ES92第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 11111ES92 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：1240更新時(shí)間：2022-02-09 15:51:40
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 11111ES92 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11111ES92 | 10000 U | 1426.00 |
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11111ES93 | 50000 U | 4626.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過(guò)基因工程技術(shù)得到的新一代逆轉(zhuǎn)錄酶，與Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比，其cDNA合成速度快，且熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受高達(dá)60℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí)，該酶增強(qiáng)了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase合成全長(zhǎng)cDNA的能力也有了提升，可擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)19.8 kb的cDNA。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
11111ES92 (10000 U) | 11111ES93 (50000 U) | ||
11111-A | 5×Hifair® Ⅲ Buffer | 250 μL | 1250 μL |
11111-B | Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
產(chǎn)品應(yīng)用
全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)構(gòu)建；終點(diǎn)法PCR；實(shí)時(shí)定量PCR等。
活性定義
以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物，在37℃，10 min內(nèi)，將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。
注意事項(xiàng)
1）請(qǐng)保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈；操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩；實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free，以防止RNase污染；
2）所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行，防止RNA降解；
3）為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄，建議使用高質(zhì)量的RNA樣本；
4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
5）本產(chǎn)品僅作科研用途。
第一鏈cDNA合成操作步驟
1. RNA變性（此步為可選步驟，RNA變性有助于打開二級(jí)結(jié)構(gòu)，可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。）
組分 | 使用量 |
RNase free H2O | to 13 μL |
Oligo (dT)18 (50 μM) | 1 μL |
or Random Primers (50 μM) | or 1 μL |
or Gene Specific Primers (2 μM) | or 1 μL |
模板RNA | Total RNA: 10 pg -5 μg或mRNA:10 pg-500 ng |
65℃加熱5 min，迅速置于冰上冷卻2 min。簡(jiǎn)短離心收集反應(yīng)液后加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液，并用移液器輕輕吹打混勻。
2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制（20 μL體系）
組分 | 使用量 |
上一步的反應(yīng)液 | 13 μL |
5×Hifair® Ⅲ Buffer | 4 μL |
dNTP Mix (10 mM) | 1 μL |
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
RNase inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
溫度 | 時(shí)間 |
25℃ | 5 min |
55℃ | 15-30 min |
85℃ | 5 min |
【注】：1）當(dāng)使用Random Primers時(shí)，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略；
2）逆轉(zhuǎn)錄溫度：推薦使用55℃；對(duì)于高GC含量模板或者復(fù)雜模板，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高到60℃；
3) 可將逆轉(zhuǎn)錄時(shí)間延長(zhǎng)到45-60min，有助于提高產(chǎn)量；
4）85℃加熱5 min，目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。
※ 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng)，也可-20℃短期保存，若需長(zhǎng)期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11121ES60 | 100 T |
Hifair®II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus) | 11123ES60 | 100 T |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | 11137ES60 | 100T |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11139ES60 | 100T |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus) | 11141ES60 | 100T |
Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox ) | 11201ES08 | 5 mL |
Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (Low Rox Plus) | 11202ES08 | 5 mL |
Hifair® qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) | 11203ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，No Rox) | 11195ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，Low Rox) | 11196ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，High Rox) | 11197ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，No Rox) | 11198ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，Low Rox) | 11199ES08 | 5 mL |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗體法，High Rox) | 11200ES08 | 5 mL |
HB210922
相關(guān)產(chǎn)品
